RBL-2H3細胞におけるイオノマイシン誘発脱顆粒の原子力顕微鏡研究

マスト細胞脱顆粒は、サイトカイン、エイコサノイド、およびそれらの分泌顆粒の放出に関連するマスト細胞の典型的なアナフィラキシープロセスであり、アナフィラクトゲン刺激時の人体のアレルギー性炎症反応において非常に重要な役割を果たします。イオノフォアカルシウムイオノマイシンは、マスト細胞脱顆粒研究の脱顆粒誘導剤として広く使用されています。現在の研究では、RBL-2H3好塩基性白血病細胞株細胞のイオノマイシン誘発脱顆粒を、高解像度の原子間力顕微鏡（AFM）によってin vitroで調査しました。細胞内遊離Ca2+レベルおよびβ-ヘキソサミニダーゼ放出を増加させる可能性のあるイオノマイシンは、RBL-2H3細胞の細胞質領域に一種の特異性小胞の形成を誘導することがわかった。イオノマイシンによって誘導された小胞は、F-アクチンの制御により、RBL-2H3細胞を囲む大量の顆粒を放出するために復segします。これらの結果は、ナノスケールでのイオノマイシン誘発マスト細胞脱顆粒の正確な形態学的情報を提供します。これは、イオノマイシン誘発性マスト細胞アナフィラキシーモデルの理解に役立ち、マスト細胞のアレルギー炎症反応の検出のためのAFMの適用性を検証することもできます。スキャン38：525-534、2016。©2016 Wiley Repionicals、Inc。

Mast cell degranulation is the typical anaphylaxis process of mast cells associated with the release of cytokines, eicosanoids and their secretory granules, which play very important roles in the allergic inflammatory response of the human body upon anaphylactogen stimulation. The calcium ionophore ionomycin is widely used as a degranulation induction agent for mast cell degranulation studies. In the present work, ionomycin-induced degranulation of RBL-2H3 basophilic leukemia cell line cells was investigated in vitro by high resolution atomic force microscopy (AFM). Ionomycin, which could increase the intracellular free Ca2+ level and β-Hexosaminidase release, was found to induce the formation of a kind of peculiar vesicles in the cytoplasm area of RBL-2H3 cells. Those vesicles induced by ionomycin would desintegrate to release a larger amount of granules surrounding RBL-2H3 cells by the controlling of F-actin. These results provide the precise morphological information of ionomycin-induced mast cell degranulation at nanoscale, which could benefit our understanding of ionomycin-induced mast cell anaphylaxis model and also validate the applicability of AFM for the detection of allergic inflammatory response in mast cells. SCANNING 38:525-534, 2016. © 2016 Wiley Periodicals, Inc.