抗アポトーシスBcl-2ファミリータンパク質A1/BFL-1は、好中球の生存と恒常性を調節し、PI3KおよびJAK/STATシグナル伝達を介して制御されます

好中球の顆粒球は、葉遺伝性菌に対する第一系統の自然エフェクター細胞です。好中球の寿命は短く、炎症誘発性刺激によって延長され、細胞の機能性を制御し、組織の損傷を決定できます。原発性好中球の実験的分析は、寿命が短く、遺伝的操作の可能性がないために困難です。不死化前駆細胞からの好中球分化のHOXB8システムは、in vitroでの好中球の無制限の産生の利点と、容易な遺伝子修飾を提供します。ここでこのシステムを使用して、好中球の生存と恒常性のための、特徴付けられていない抗アポトーシスB細胞リンパ腫タンパク質2（BCL-2）ファミリーメンバーA1/BFL-1（BCL-2関連タンパク質A1）の役割を分析します。好中球前駆細胞の。A1の低成分mRNAおよびタンパク質発現が検出されましたが、A1は分化中に早期に上方制御されました。炎症誘発性刺激は、MCL-1の転写後調節（誘導骨髄性白血病細胞分化タンパク質）とは対照的に、強い、主に転写、A1アップレギュレーションを引き起こしました。阻害剤の研究では、ホスホイノシチド-3キナーゼ（PI3K）/AKTおよびヤヌスキナーゼ（JAK）/シグナルトランスデューサーと転写の活性化因子（STAT）がA1の発現と前駆細胞および成熟した好中球の生存に必要であることが示されました。shRNAを介した構成的A1ノックダウン（KD）前駆細胞の維持障害。shRNA実験により、さらに、好中球分化中にA1が必要であることが、炎症誘発性刺激時に成熟した好中球に必要であることが示されました。私たちのデータは、さらに2つの抗アポトーシスタンパク質A1とMcl-1の差別的調節を示しています。関連する発見は、一次ヒト好中球で確認されました。私たちのデータは、確立されたMCL-1に加えて、A1が好中球生存と恒常性に実質的に寄与していることを示しています。したがって、A1は抗炎症療法の有望な標的である可能性があります。

Neutrophil granulocytes are innate effector cells of the first line of defense against pyogenic bacteria. Neutrophil lifespan is short, is prolonged by pro-inflammatory stimuli, controls functionality of the cells and can determine tissue damage. Experimental analysis of primary neutrophils is difficult because of their short lifespan and lack of possibilities of genetic manipulation. The Hoxb8 system of neutrophil differentiation from immortalized progenitor cells offers the advantage of unlimited production of neutrophils in vitro as well as easy genetic modification. We here use this system to analyze the role of the poorly characterized anti-apoptotic B-cell lymphoma protein 2 (Bcl-2) family member A1/Bfl-1 (Bcl-2-related protein A1) for survival and homeostasis of neutrophils and of neutrophil progenitors. Low constitutive mRNA and protein expression of A1 was detected, while A1 was transiently upregulated early during differentiation. Pro-inflammatory stimuli caused strong, mainly transcriptional, A1 upregulation, in contrast to posttranscriptional regulation of Mcl-1 (induced myeloid leukemia cell differentiation protein). Inhibitor studies showed that phosphoinositide-3 kinase (PI3K)/Akt and Janus kinase (JAK)/signal transducer and activator of transcription (STAT) is required for A1 expression and survival of progenitors and mature neutrophils. ShRNA-mediated constitutive A1 knockdown (KD) impaired maintenance of progenitors. ShRNA experiments further showed that A1 was required early during neutrophil differentiation as well as in mature neutrophils upon pro-inflammatory stimulation. Our data further indicate differential regulation of the two anti-apoptotic proteins A1 and Mcl-1. Relevant findings were confirmed in primary human neutrophils. Our data indicate that A1, in addition to the well-established Mcl-1, substantially contributes to neutrophil survival and homeostasis. A1 may thus be a promising target for anti-inflammatory therapy.