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Reports of biochemistry & molecular biology2012Oct01Vol.1issue(1)

Cros 1の分子クローニングと発現1:サフラン花粉(Crocus sativus)の職業アレルゲン

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PMID:26989701DOI:
文献タイプ:
  • Journal Article
概要
Abstract

背景:サフランの栽培はイランの南東に拡大しており、サフランの花粉に対するアレルギーは、この植物の処理に関与する労働者で起こります。サフラン花粉アレルギーに関与する主要なアレルゲンをクローン、配列、および発現させ、組換えを天然アレルゲンと比較することを目指しました。 方法:サフラン花粉のアレルゲンであるCro S 1のN末端アミノ酸配列は、免疫ブロット後に決定されました。このアレルゲンのcDNAエンコードは、N末端アミノ酸配列に基づいたプライマーを使用してPCRによってクローン化されました。組換えCros 1(RCRO S 1)は、Pichia pichia pichia pichia pichia filtrationによって均一性に精製されました。花粉抽出物によるRCro S 1へのIgE結合の阻害は、ELISAによって分析されました。 セクションのタイトル:アレルゲンCRO S 1は、サフランの花粉抽出物から特定され、PCRによってクローン化されました。Cros 1 cDNAは、ChenopodiumアルバムとLigastrum vulgarisの花粉タンパク質と相同性の酸性ポリペプチドを定義しました。RCro S 1は、P。pastorisで28 mg/lで発現しました。サフランの花粉抽出物は、患者血清IgEのRCROS 1への結合を阻害しました。 結論:最初のクロッカスサティバス花粉アレルゲンを特定してクローン化しました。RCRO S 1 cDNAは、Che A 1、Lamb's-Quarter、Chenopodiumアルバム、Caryophyllales、花粉の主要なアレルゲン(97%)と非常に高い相同性を示しています。CRO S 1は、サフランに対する職業アレルギーの特定の診断と構造研究のための有用なツールです。

背景:サフランの栽培はイランの南東に拡大しており、サフランの花粉に対するアレルギーは、この植物の処理に関与する労働者で起こります。サフラン花粉アレルギーに関与する主要なアレルゲンをクローン、配列、および発現させ、組換えを天然アレルゲンと比較することを目指しました。 方法:サフラン花粉のアレルゲンであるCro S 1のN末端アミノ酸配列は、免疫ブロット後に決定されました。このアレルゲンのcDNAエンコードは、N末端アミノ酸配列に基づいたプライマーを使用してPCRによってクローン化されました。組換えCros 1(RCRO S 1)は、Pichia pichia pichia pichia pichia filtrationによって均一性に精製されました。花粉抽出物によるRCro S 1へのIgE結合の阻害は、ELISAによって分析されました。 セクションのタイトル:アレルゲンCRO S 1は、サフランの花粉抽出物から特定され、PCRによってクローン化されました。Cros 1 cDNAは、ChenopodiumアルバムとLigastrum vulgarisの花粉タンパク質と相同性の酸性ポリペプチドを定義しました。RCro S 1は、P。pastorisで28 mg/lで発現しました。サフランの花粉抽出物は、患者血清IgEのRCROS 1への結合を阻害しました。 結論:最初のクロッカスサティバス花粉アレルゲンを特定してクローン化しました。RCRO S 1 cDNAは、Che A 1、Lamb's-Quarter、Chenopodiumアルバム、Caryophyllales、花粉の主要なアレルゲン(97%)と非常に高い相同性を示しています。CRO S 1は、サフランに対する職業アレルギーの特定の診断と構造研究のための有用なツールです。

BACKGROUND: The cultivation of saffron is expanding through the southeast of Iran, and allergy to saffron pollen occurs in workers involved in processing this plant. We aimed to clone, sequence and express a major allergen involved in saffron pollen allergy, and to compare the recombinant with the natural allergen. METHODS: The N-terminal amino acid sequence of Cro s 1, an allergen from saffron pollen, was determined after immunoblotting. The cDNA encoding for this allergen was cloned by PCR utilizing a primer based on the N-terminal amino acid sequence. Recombinant Cro s 1 (rCro s 1) was expressed as a soluble protein in Pichia pastoris and purified to homogeneity by gel filtration. Inhibition of IgE binding to rCro s 1 by pollen extract was analyzed by ELISA. SECTION TITLE: The allergen Cro s 1 was identified from saffron pollen extracts and cloned by PCR. Cro s 1 cDNA defined an acidic polypeptide with homology to pollen proteins from Chenopodium album and Ligastrum vulgaris. The rCro s 1 was expressed in P. pastoris at 28 mg/l. Saffron pollen extract inhibited the binding of patient serum IgE to rCro s 1. CONCLUSION: We identified and cloned the first Crocus sativus pollen allergen. rCro s 1 cDNA shows a very high homology with Che a 1, the major allergen of lamb's-quarter, Chenopodium album, Caryophyllales, pollen (97%). Cro s 1 is a useful tool for specific diagnosis and structural studies of occupational allergy to saffron.

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