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タンパク質およびペプチドマイクロアレイ製造のための3次元(3D)ポリマーブラシ基質を開発しました。この基質は、メタクリル酸グリシジル(GMA)および2-ヒドロキシエチルメタクリレート(HEMA)単層(HEMA)の単層(HEMA)の単層(HEMA)の単層を介して表面化した原子移動ラジカルの単極化により幅広く調製されました。ガラススライド上の重合(SI-ATRP)。得られたポリ(グリシジルメタクリレート-Co-2-ヒドロキシエチルメタクリレート)(P(GMA-HEMA))ブラシ基質のパフォーマンスは、ヒトIgGのウサギ抗ヒューマンIgG抗体をタンパク質マイクロアレイ上のラビット抗ヒューマンIgG抗体と結合し、マトリックス糸状糸状岩石酵素の測定により評価しました(MMP)ペプチドマイクロアレイでの活動。P(GMAヘマ)ブラシ基板は、2次元(2D)平面エポキシスライドのものよりも、タンパク質とペプチドの固定化能力が高いことを示しました。さらに、ウサギ抗ヒューマンIgG抗体検出に対するP(GMA-HEMA)ブラシベースのマイクロアレイの感度は、その2D対応物の感受性よりもはるかに高かった。MMPの酵素活性は、MMP-2で6.0 pg ml(-1)、MMP-9で5.7 pg ml(-1)の低い検出限界で特異的に決定されました。PHEMAの生体適合性を活用することにより、P(GMA-HEMA)ブラシベースのペプチドマイクロアレイも使用して、チップから培養された細胞によってMMP-2およびMMP-9の分泌を評価するか、チップ上で直接培養し、満足度結果が得られました。
タンパク質およびペプチドマイクロアレイ製造のための3次元(3D)ポリマーブラシ基質を開発しました。この基質は、メタクリル酸グリシジル(GMA)および2-ヒドロキシエチルメタクリレート(HEMA)単層(HEMA)の単層(HEMA)の単層(HEMA)の単層を介して表面化した原子移動ラジカルの単極化により幅広く調製されました。ガラススライド上の重合(SI-ATRP)。得られたポリ(グリシジルメタクリレート-Co-2-ヒドロキシエチルメタクリレート)(P(GMA-HEMA))ブラシ基質のパフォーマンスは、ヒトIgGのウサギ抗ヒューマンIgG抗体をタンパク質マイクロアレイ上のラビット抗ヒューマンIgG抗体と結合し、マトリックス糸状糸状岩石酵素の測定により評価しました(MMP)ペプチドマイクロアレイでの活動。P(GMAヘマ)ブラシ基板は、2次元(2D)平面エポキシスライドのものよりも、タンパク質とペプチドの固定化能力が高いことを示しました。さらに、ウサギ抗ヒューマンIgG抗体検出に対するP(GMA-HEMA)ブラシベースのマイクロアレイの感度は、その2D対応物の感受性よりもはるかに高かった。MMPの酵素活性は、MMP-2で6.0 pg ml(-1)、MMP-9で5.7 pg ml(-1)の低い検出限界で特異的に決定されました。PHEMAの生体適合性を活用することにより、P(GMA-HEMA)ブラシベースのペプチドマイクロアレイも使用して、チップから培養された細胞によってMMP-2およびMMP-9の分泌を評価するか、チップ上で直接培養し、満足度結果が得られました。
We developed a three-dimensional (3D) polymer-brush substrate for protein and peptide microarray fabrication, and this substrate was facilely prepared by copolymerization of glycidyl methacrylate (GMA) and 2-hydroxyethyl methacrylate (HEMA) monomers via surface-initiated atom transfer radical polymerization (SI-ATRP) on a glass slide. The performance of obtained poly(glycidyl methacrylate-co-2-hydroxyethyl methacrylate) (P(GMA-HEMA)) brush substrate was assessed by binding of human IgG with rabbit antihuman IgG antibodies on a protein microarray and by the determination of matrix metalloproteinase (MMP) activities on a peptide microarray. The P(GMA-HEMA) brush substrate exhibited higher immobilization capacities for proteins and peptides than those of a two-dimensional (2D) planar epoxy slide. Furthermore, the sensitivity of the P(GMA-HEMA) brush-based microarray on rabbit antihuman IgG antibody detection was much higher than that of its 2D counterpart. The enzyme activities of MMPs were determined specifically with a low detection limit of 6.0 pg mL(-1) for MMP-2 and 5.7 pg mL(-1) for MMP-9. By taking advantage of the biocompatibility of PHEMA, the P(GMA-HEMA) brush-based peptide microarray was also employed to evaluate the secretion of MMP-2 and MMP-9 by cells cultured off the chip or directly on the chip, and satisfactory results were obtained.
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