デクスメデトミジンは、IL-12およびIL-23の合成と分泌を妨害することにより、ヒト臍帯血由来の樹状細胞の成熟と機能を阻害します。

目的：培養されたヒト樹状細胞（DC）に対するデクスメデトミジンの効果と基礎となるメカニズムを調査する。 方法：ヒトDCおよび細胞毒性Tリンパ球（CTL）は、密度勾配遠心分離により、ヒト臍帯単核細胞から得られました。培養DCは、デクスメデトミジン群、デクスメデトミジンとヨヒンビン（デクスメデトミジン阻害剤）群および対照群の3つのグループに分けられました。3つのグループのDCは、それぞれデクスメデトミジン、デクスメデトミジンとヨヒンビンおよび培養培地で処理されました。洗浄後、DCを培養CTLと共インキュベートしました。DCSの成熟度は、（1）HLA-DR-、CD86-、およびCD80陽性細胞（フローサイトメトリー）の比を検出することにより評価されました。DCSの機能は、CTLSの増殖（MTSアッセイ）および細胞毒性活性（IFN-γのELISA）を検出することにより評価されました。さらに、DCSを調節するDexメデトミジンのメカニズムを調査するために、α2-アドレナリン受容体とDCの下流シグナルも検出されました。 結果：HLA-DR-、CD86-、およびCD80陽性細胞の総細胞に対する比率は、3つのグループ間で類似していた（P> 0.05）。対照群と比較して、培地中のIL-12およびIL-23のタンパク質レベル、DCSのIL-12 P35、IL-12 P40およびIL-23 P19のmRNAレベルはすべて、デクスメデトミジン群で減少しました（P <0.05）。さらに、CTLの増殖とIFN-γの分泌も、コントロールグループと比較して、デクスメデトミジン群で減少しました（P <0.05）。さらに、デクスメデトミジン基でデクスメデトミジンによって誘導されたこれらの変化は、デクスメデトミジンとヨヒンビン基のα2-アドレナリン受容体阻害剤ヨヒンビンによって逆転しました。また、Dexメデトミジン基でIL-12 P35、IL-12 P40、IL-23 P19のmRNAレベルの減少がERK1/2またはAKT阻害剤によって逆転する可能性があることがわかりました。 結論：Dexメデトミジンは、DCの成熟を阻害し、CTLの増殖および細胞毒性活性を低下させることにより、ヒト免疫を負に調節する可能性があります。α2-アドレナリン受容体とその下流分子ERK1/2およびAKTは、DCS上のデクスメデトミジンの調節に密接に関与しています。

AIMS: To investigate the effects and underlying mechanism of dexmedetomidine on the cultured human dendritic cells (DCs). METHODS: Human DCs and cytotoxic T lymphocytes (CTLs) were obtained from human cord blood mononuclear cells by density gradient centrifugation. Cultured DCs were divided into three groups: dexmedetomidine group, dexmedetomidine plus yohimbine (dexmedetomidine inhibitor) group and control group. DCs in the three groups were treated with dexmedetomidine, dexmedetomidine plus yohimbine and culture medium, respectively. After washing, the DCs were co-incubated with cultured CTLs. The maturation degree of DCs was evaluated by detecting (1) the ratios of HLA-DR-, CD86-, and CD80-positive cells (flow cytometry), and (2) expression of IL-12 and IL-23 (PCR and Elisa). The function of DCs was evaluated by detecting the proliferation (MTS assay) and cytotoxicity activity (the Elisa of IFN-γ) of CTLs. In addition, in order to explore the mechanisms of dexmedetomidine modulating DCs, α2-adrenergic receptor and its downstream signals in DCs were also detected. RESULTS: The ratios of HLA-DR-, CD86-, and CD80-positive cells to total cells were similar among the three groups (P>0.05). Compared to the control group, the protein levels of IL-12 and IL-23 in the culture medium and the mRNA levels of IL-12 p35, IL-12 p40 and IL-23 p19 in the DCs all decreased in dexmedetomidine group (P<0.05). In addition, the proliferation of CTLs and the secretion of IFN-γ also decreased in the dexmedetomidine group, compared with the control group (P<0.05). Moreover, these changes induced by dexmedetomidine in the dexmedetomidine group were reversed by α2-adrenergic receptor inhibitor yohimbine in the dexmedetomidine plus yohimbine group. It was also found the decrease of mRNA levels of IL-12 p35, IL-12 p40 and IL-23 p19 in the dexmedetomidine group could be reversed by ERK1/2 or AKT inhibitors. CONCLUSION: Dexmedetomidine could negatively modulate human immunity by inhibiting the maturation of DCs and then decreasing the proliferation and cytotoxicity activity of CTLs. The α2-adrenergic receptors and its downstream molecules ERK1/2 and AKT are closely involved in the modulation of dexmedetomidine on DCs.