蛍光ホルマザンとテトラゾリウム塩 - 蛍光細胞毒性アッセイに向けて

MTTアッセイなどのホルマザンベースの比色毒性アッセイは、通常、代謝的に活性な細胞のみを使用して細胞生存率を評価するために使用され、テトラゾリウム塩をホルマザンに還元し、その後吸光度によって定量化されます。蛍光は、カリメトリックアッセイと比較していくつかの利点を提供し、フローサイトメトリーや共焦点顕微鏡などの技術を分析に使用できるようにします。ここでは、蛍光ホルマザン10、11、12、およびそれらの対応するテトラゾリウム塩13、16、24は、それぞれ既知のフルオロフォア骨格（クマリン、フルオレセイン、ロドール）の組み込みにより合成され、共役システムが混乱し、蛍光の蛍光を防止または還元する共役システムの破壊が合成されました。テトラゾリウム塩。これらのテトラゾリウム塩は、細胞を含む蛍光ホルマザンに成功裏に還元され、蛍光細胞毒性アッセイの発生に一歩前進しました。

Formazan-based colorimetric cytotoxicity assays, such as the MTT assay, are typically used to assess cell viability with only metabolically active cells reducing tetrazolium salts into the formazans, which is then quantified by absorbance. Fluorescence offers several advantages compared to colorimetric assays and would enable techniques such as flow cytometry and confocal microscopy to be used for analysis. Here, fluorescent formazans 10, 11 and 12, and their corresponding tetrazolium salts 13, 16 and 24, respectively, were synthesised by incorporation of a known fluorophore backbone (coumarin, fluorescein and rhodol) with disruption of the conjugated system preventing or reducing fluorescence of the tetrazolium salts. These tetrazolium salts were successfully reduced to the fluorescent formazans with cells and offer a step forward in the development of fluorescent cytotoxicity assays.