全血サンプルからの4つのDNA抽出プロトコルの比較評価

すべての生物には、細胞内にデオキシリボ核酸（DNA）があります。DNAは、生物を構築および維持するために必要なすべての情報を含む複雑な分子です。DNA抽出は、DNAの研究における最も基本的で必須の技術の1つであり、分子生物学、バイオテクノロジー、バイオインフォマティクス研究所の大きな進歩を可能にします。全血サンプルは、DNAを取得するために使用される主要なソースの1つであり、この号では多くの異なるプロトコルが利用可能です。現在の研究では、血液サンプルからの4つのDNA抽出プロトコルを比較しました。修正されたフェノールクロロホルムプロトコル、2つの塩漬けおよび酵素を含まない方法、および商用キットを含めます。これらのプロトコルによって抽出されたDNAは、PCR法の時間需要、品質と量、毒性、および機能性に従って分析されました。また、抽出されたDNAの品質と量は、ゲル電気泳動およびナノドロップ分光光度測定法によって調査されました。DNA純度（A260/A280）に関するこれらの方法の間に有意な違いはないことが観察されましたが、フェノール/クロロホルム法のDNA収率（Ng DNA/μL）は他の方法よりも高かったことが観察されました。さらに、フェノール/クロロホルムは最も毒性のある方法であり、他の方法よりも時間がかかります。Roche Diagnostics GmbHキットは4つの方法の中で最も高価でしたが、抽出時間が最も少なく、最も安全な方法でした。

All organisms have Deoxyribonucleic acid (DNA) within their cells. DNA is a complex molecule that contains all of the information necessary to build and maintain an organism. DNA extraction is one of the most basic and essential techniques in the study of DNA that allow huge advances in molecular biology, biotechnology and bioinformatics laboratories. Whole blood samples are one of the main sources used to obtain DNA and there are many different protocols available in this issue. In current research, compared four DNA extraction protocols from blood samples; include modified phenol-chloroform protocol, two salting-out and enzyme free method and from commercial kit. The extracted DNAs by these protocols were analyzed according to their time demands, quality and quantity, toxicity and functionality in PCR method. Also the quality and quantity of the extracted DNA were surveyed by gel electrophoresis and Nanodrop spectrophotometry methods. It was observed that there are not significantly differences between these methods about DNA Purity (A260/A280), but the DNA yield (ng DNA/μl) of phenol/chloroform method was higher than other methods. In addition, phenol/chloroform was the most toxic method and it takes more time than other methods. Roche diagnostics GmbH kit was the most expensive among the four methods but the least extraction time was required and it was the safest method.