遺伝子組み換えK562フィーダー細胞を使用したNK細胞の拡大

自然キラー（NK）細胞は、増殖性サイトカイン（IL-2やIL-15など）によって活性化時に拡張できます。NK細胞の膨張は、腫瘍細胞株やPBMCなどのフィーダー細胞からのタンパク質によって大幅に増強できます。したがって、IL-2およびIL-15を含む培地の照射フィーダー細胞とNK細胞の共培養システムは、多くのNK細胞を生成するために開発されましたが、フィーダー細胞なしの抗CD3抗体（OKT-3）を使用したNK細胞拡大プロトコルは開発されました。開発されています。一般的に使用されるフィーダー細胞株は、RPMI8866、エプスタインバーリンパ芽球細胞株（EBV-LCL）、およびK562です。NK感受性K562細胞による刺激は、IL-2、IL-15、およびIL-21へのNK細胞増殖を組み合わせて増強することが知られています。。ダリオ・カンパナ博士のグループは、K562細胞によって共発現された膜結合IL-15および4-1BBLがK562特異的NK刺激能力を増強するために相乗的に作用し、末梢血CD56（+）CD3（ - ）NKの激しい拡大をもたらすことを発見しました。Tリンパ球の付随する成長のない細胞。ここでは、Ge_K562細胞との共培養により、PBMCの間のヒトNK細胞のin vitro拡大方法について説明します。

Natural killer (NK) cells can be expanded upon activation by proliferative cytokines (such as IL-2 and IL-15). The NK cell expansion can be greatly enhanced by proteins from feeder cells such as tumor cell lines or PBMCs. Therefore, coculture systems of irradiated feeder cells and NK cells in media containing IL-2 and IL-15 have been developed to generate large numbers of NK cells, although NK cell expansion protocol using anti-CD3 antibody (OKT-3) without feeder cells has also been developed. Commonly used feeder cell lines are RPMI8866, Epstein-Barr lymphoblastoid cell line (EBV-LCL), and K562. Stimulation with NK-sensitive K562 cells is known to augment NK cell proliferation to IL-2, IL-15, and IL-21 in combination.Recently, remarkable NK cell-expansion rates are achieved when genetically engineered (GE) feeder cells are used. Dr. Dario Campana's group found that membrane-bound IL-15 and 4-1BBL, coexpressed by K562 cells, acted synergistically to augment K562-specific NK stimulatory capacity, resulting in vigorous expansion of peripheral blood CD56(+) CD3(-) NK cells without concomitant growth of T lymphocytes. Here, we describe an in vitro expansion method of human NK cells among PBMCs by coculturing with GE_K562 cells.