生物学的サンプルの脂質抽出のために酢酸を置き換えることにより、ブタノール - メタノール（BUME）法を改善しました

生物学的サンプルからの脂質の抽出は、特に脂質抽出物が質量分析計に直接注入されるショットガン脂質腫の場合、脂質の重要なステップです。ブタノール - メタノール（BUME）抽出法は、もともと1％酢酸を含む血漿サンプルから脂質を抽出するために開発されました。いくつかの脂質は酸性環境に敏感であることを考慮して、酢酸を塩化リチウム溶液に置き換えることでこのプロトコルを修正し、修飾抽出を組織サンプルに拡張しました。ラット心臓サンプルの酸性ビューム抽出物におけるプラズマロゲンレベルの有意な減少は見つかりませんでしたが、ラット肝臓、心臓、血漿などのさまざまな組織サンプルを抽出するために修正された方法が確立されました。脂質クラスの大部分の本質的に同一のプロファイルは、修正されたbumeおよび従来のブライダイヤー法の抽出物から得られました。ただし、元の、修正されたBUME法も、生物学的サンプルの4-ヒドロキシヤル種測定に適していないことがわかった。

Extraction of lipids from biological samples is a critical step in lipidomics, especially for shotgun lipidomics where lipid extracts are directly infused into a mass spectrometer. The butanol-methanol (BUME) extraction method was originally developed to extract lipids from plasma samples with 1 % acetic acid. Considering some lipids are sensitive to acidic environments, we modified this protocol by replacing acetic acid with lithium chloride solution and extended the modified extraction to tissue samples. Although no significant reduction of plasmalogen levels in the acidic BUME extracts of rat heart samples was found, the modified method was established to extract various tissue samples, including rat liver, heart, and plasma. Essentially identical profiles of the majority of lipid classes were obtained from the extracts of the modified BUME and traditional Bligh-Dyer methods. However, it was found that neither the original, nor the modified BUME method was suitable for 4-hydroxyalkenal species measurement in biological samples.