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Carbohydrate research2016Aug05Vol.431issue()

MALDI-MSおよびMALDI-MS/MSを使用した上皮卵巣癌細胞株と非腫瘍上皮卵巣細胞株から分離されたグリコリンゴ脂質の比較

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文献タイプ:
  • Comparative Study
  • Journal Article
概要
Abstract

グリコリンゴ脂質(GSL)は重要な生体分子であり、GSL貯蔵障害や癌などの多くの疾患に関連しています。その結果、GSLの発現は、明らかに健康な細胞株と比較して、卵巣癌細胞株で変化する可能性があります。ここでは、上皮卵巣癌細胞株SKOV3および非腫瘍上皮卵巣細胞株T29におけるGSLの微分表現を、マトリックス支援レーザー脱着/イオン化 - マス分光法(MALDI-MS)およびMALDI-MS/MSを使用して研究しました。SKOV3およびT29細胞株からのGSLの分離は、Folchパーティションを使用して実行されました。GSLはMALDI-MSによって正常に検出され、MALDI-MS/MSフラグメンテーションパターンとSimLipIDデータベースにあるMS/MSデータとの比較により構造的に割り当てられました。さらに、脂質マップを使用して、MALDI-MSスペクトルにGSLイオン質量を割り当てました。両方の細胞株に由来するFolch Partition Lower(クロロホルム/メタノール)相で17の中性GSLが同定されましたが、5つのグロボシリーズ中性GSLは、SkoV3細胞株のFolch分配下相でのみ識別されました。いくつかの異なるシアリル化GSLは、SKOV3およびT29細胞株のFolch Partition Upper(水/メタノール)相で検出されました。全体として、この研究は、非腫瘍性上皮卵巣細胞株と比較して、上皮卵巣癌細胞株におけるGSLのグリコシル化の変化と増加を示しています。

グリコリンゴ脂質(GSL)は重要な生体分子であり、GSL貯蔵障害や癌などの多くの疾患に関連しています。その結果、GSLの発現は、明らかに健康な細胞株と比較して、卵巣癌細胞株で変化する可能性があります。ここでは、上皮卵巣癌細胞株SKOV3および非腫瘍上皮卵巣細胞株T29におけるGSLの微分表現を、マトリックス支援レーザー脱着/イオン化 - マス分光法(MALDI-MS)およびMALDI-MS/MSを使用して研究しました。SKOV3およびT29細胞株からのGSLの分離は、Folchパーティションを使用して実行されました。GSLはMALDI-MSによって正常に検出され、MALDI-MS/MSフラグメンテーションパターンとSimLipIDデータベースにあるMS/MSデータとの比較により構造的に割り当てられました。さらに、脂質マップを使用して、MALDI-MSスペクトルにGSLイオン質量を割り当てました。両方の細胞株に由来するFolch Partition Lower(クロロホルム/メタノール)相で17の中性GSLが同定されましたが、5つのグロボシリーズ中性GSLは、SkoV3細胞株のFolch分配下相でのみ識別されました。いくつかの異なるシアリル化GSLは、SKOV3およびT29細胞株のFolch Partition Upper(水/メタノール)相で検出されました。全体として、この研究は、非腫瘍性上皮卵巣細胞株と比較して、上皮卵巣癌細胞株におけるGSLのグリコシル化の変化と増加を示しています。

Glycosphingolipids (GSLs) are important biomolecules, which are linked to many diseases such as GSL storage disorders and cancer. Consequently, the expression of GSLs may be altered in ovarian cancer cell lines in comparison to apparently healthy cell lines. Here, differential expressions of GSLs in an epithelial ovarian cancer cell line SKOV3 and a nontumorigenic epithelial ovarian cell line T29 were studied using matrix-assisted laser desorption/ionization-mass spectrometry (MALDI-MS) and MALDI-MS/MS. The isolation of GSLs from SKOV3 and T29 cell lines was carried out using Folch partition. GSLs were successfully detected by MALDI-MS, and structurally assigned by a comparison of their MALDI-MS/MS fragmentation patterns with MS/MS data found in SimLipid database. Additionally, LIPID MAPS was used to assign GSL ion masses in MALDI-MS spectra. Seventeen neutral GSLs were identified in Folch partition lower (chloroform/methanol) phases originating from both cell lines, while five globo series neutral GSLs were identified only in the Folch partition lower phase of SKOV3 cell line. Several different sialylated GSLs were detected in Folch partition upper (water/methanol) phases of SKOV3 and T29 cell lines. Overall, this study demonstrates the alteration and increased glycosylation of GSLs in an epithelial ovarian cancer cell line in comparison to a nontumorigenic epithelial ovarian cell line.

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