正常なヒト染色体11は、ヒト子宮頸部腫瘍細胞株Sihaの腫瘍形成性を抑制する

正常な線維芽細胞に由来するヒト染色体11の能力を調べて、ヒト子宮頸部腫瘍細胞株であるSIHA細胞の腫瘍形成性を抑制しました。DNAトランスフェクションを使用して、ヒト染色体に選択可能なマーカー（抗生物質G418に対する耐性をコードするPSV2NEO遺伝子）でタグ付けされ、細胞のハイブリダイゼーションとマイクロセル移動技術によってマウスA9細胞に移動し、マイクロセル移植によってSIHA細胞に移動しました。これらの手順により、15の独立したG418耐性クローンが出現し、そのうち5つは無傷のヒト染色体11の1つまたは2つの追加コピーがありました。5つのSiha-Microcellハイブリッドのすべてにおけるヒト染色体11。Neoタグ付きヒト染色体12の単一コピーを含む2つのSiha-Microcellハイブリッドも、同じ方法によって分離されました。染色体11（SIHA-11）の1つまたは2つの追加コピーを含むSIHAクローンの腫瘍形成性は抑制されました。5つのSIHA-11クローンのうち4つはヌードマウスに腫瘍を形成しませんでしたが、親のSIHA細胞と余分な染色体12を持つSIHA細胞の両方が30日以内に腫瘍を形成しました。1つのSIHA-11細胞クローンは、注射後90日後に単一の腫瘍を形成しました。このまれな腫瘍は、染色体11のコピーを1つ失い、再注入すると急速に形成されました。これらの結果は、染色体12ではなく正常なヒト染色体11の単一コピーの導入がSIHA細胞の腫瘍形成性を抑制し、ヒト子宮頸部腫瘍の推定腫瘍抑制遺伝子（または遺伝子）のヒト染色体11の存在を示していることを示しています。。

We examined the ability of human chromosome 11 derived from normal fibroblast cells to suppress the tumorigenicity of SiHa cells, a human cervical tumor cell line. Using DNA transfection, the human chromosome was tagged with a selectable marker (the pSV2neo gene, which encodes resistance to the antibiotic G418), transferred to mouse A9 cells by cell hybridization and microcell transfer techniques, and then transferred to SiHa cells by microcell transfer. These procedures resulted in the appearance of 15 independent, G418-resistant clones, 5 of which had one or two extra copies of an intact human chromosome 11. In situ chromosomal hybridization of these clones with the pSV2neo plasmid revealed the presence of a neo-tagged human chromosome 11 in all of the five SiHa-microcell hybrids. Two SiHa-microcell hybrids that contained a single copy of neo-tagged human chromosome 12 were also isolated by the same methods. The tumorigenicities of SiHa clones with one or two extra copies of chromosome 11 (SiHa-11) were suppressed; four of the five SiHa-11 clones formed no tumors in nude mice, whereas both parental SiHa cells and SiHa cells with an extra chromosome 12 formed tumors within 30 d. One SiHa-11 cell clone formed a single tumor 90 d after injection. This rare tumor had lost one copy of chromosome 11 and rapidly formed tumors when reinjected. These results indicate that the introduction of a single copy of normal human chromosome 11, but not chromosome 12, suppresses the tumorigenicity of SiHa cells, indicating the presence on human chromosome 11 of a putative tumor-suppressor gene (or genes) for human cervical tumors.