ポリアクリルアミド - ストレプトアビジン：可溶性多価の高分子類似物の単純化された構造のための新しい試薬

多価タンパク質間関節類の単純化された調製のために、可溶性高分子共役試薬であるポリアクリルアミド - ストレプトアビジン（PASA）を開発しました。分子量が約10（6）の可溶性線形ポリアクリルアミドは、限られたアルカリ加水分解によって生成されたカルボン基です。次に、カルボジミドで活性化され、過剰なカルボジイミドから分離され、ストレプトアビジンに結合します。分子あたり約20のストレプトアビジン残基を持つ結果のコンジュゲートは、ビオチン化タンパク質を結合して、既知の組成のホモまたはヘテロコンジュゲートを産生することができます。この手法を使用して、2つの抗原的に異なる細胞株のいずれかを結合できる可溶性多価ヘテロリゲーション抗体コンジュゲートと、異なるMHCクラスI抗原とマウス腫瘍細胞を特異的にラベル付けする試薬を調製しました。この方法は、T細胞受容体とMHC分子間の低親和性相互作用を測定し、免疫毒素、腫瘍標識類似物、および複雑な免疫ゲンを製造するために、エピトープの多価アレイを作成するために潜在的に役立ちます。

We have developed a soluble macromolecular conjugation reagent, polyacrylamide-streptavidin (PASA), for the simplified preparation of multivalent protein-protein conjugates. Soluble linear polyacrylamide, with a molecular weight of approximately 10(6), has carboxyl groups generated by limited alkaline hydrolysis. It is then activated with carbodiimide, separated from excess carbodiimide, and conjugated to streptavidin. The resulting conjugate, which has approximately 20 streptavidin residues per molecule, can bind biotinylated proteins to produce homo- or heteroconjugates of known composition. We have used this technique to prepare soluble multivalent heteroligating antibody conjugates that can bind either of two antigenically distinct cell lines, as well as reagents that specifically label murine tumor cells with different MHC class I antigens. The method is potentially useful for making multivalent arrays of epitopes for measuring low affinity interactions such as that between the T cell receptor and MHC molecules, as well as for making immunotoxins, tumor labelling conjugates, and complex immunogens.