シロイヌナズナの葉のダブ染色による過酸化水素の検出

このプロトコルでは、過酸化水素（いくつかの活性酸素種の1つ）のin situ検出は、以前の方法の適応を使用して3,3'-ジアミノベンジジン（DAB）で染色することにより、成熟したシロイヌナズナのロゼットの葉に記載されています（Thordal-Christensen et al。、1997; Bindschedler et al。、2006; Daudi et al。、2012）。DABは、ペルオキシダーゼなどのいくつかのヘム含有タンパク質の存在下で過酸化水素によって酸化され、暗褐色の沈殿物が生成されます。この沈殿物は、植物細胞の過酸化水素の存在と分布を検出するために染色として利用されます。プロトコルは、さまざまな種類の植物組織で過酸化水素を検出するためにわずかに変更できます。

In this protocol, the in situ detection of hydrogen peroxide (one of several reactive oxygen species) is described in mature Arabidopsis rosette leaves by staining with 3,3'-diaminobenzidine (DAB) using an adaptation of previous methods (Thordal-Christensen et al., 1997; Bindschedler et al., 2006; Daudi et al., 2012). DAB is oxidized by hydrogen peroxide in the presence of some haem-containing proteins, such as peroxidases, to generate a dark brown precipitate. This precipitate is exploited as a stain to detect the presence and distribution of hydrogen peroxide in plant cells. The protocol can be modified slightly to detect hydrogen peroxide in different types of plant tissue.