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目的:本研究の目的は、初期胚発生中のツイスト関連タンパク質1(Twist1)空間的発現パターンと機能を理解することです。 方法:マウスの埋め込み前発達全体で、Twist1タンパク質と遺伝子の全マウント二重免疫蛍光染色と逆転写(RT)-PCR分析を行いました。 結果:圧縮後、twist1の発現は発達的に分化し、胚の内部細胞で標的になると判断しました。E4.5の胚盤胞では、内細胞腫瘤の均一な染色が明らかになり、E4.75でhatch化した胚細胞の核に徐々に移行していました。さらに、胚盤胞の発達中の発現レベルに対するねじれの潜在的な調節因子の効果も求められました。したがって、Twist1発現は、高グルコースの存在下で胚の培養に続くmRNAとタンパク質レベルの両方で上方制御されているように見えました。 結論:私たちの研究は、胚の初期段階での動的なねじれ局在化を明らかにしました。結果は、系統の分離、hatch化、および胚盤胞における系統の分離、hatch化、移植のプロセスにおけるtwist1の潜在的な役割の観点から議論されています。
目的:本研究の目的は、初期胚発生中のツイスト関連タンパク質1(Twist1)空間的発現パターンと機能を理解することです。 方法:マウスの埋め込み前発達全体で、Twist1タンパク質と遺伝子の全マウント二重免疫蛍光染色と逆転写(RT)-PCR分析を行いました。 結果:圧縮後、twist1の発現は発達的に分化し、胚の内部細胞で標的になると判断しました。E4.5の胚盤胞では、内細胞腫瘤の均一な染色が明らかになり、E4.75でhatch化した胚細胞の核に徐々に移行していました。さらに、胚盤胞の発達中の発現レベルに対するねじれの潜在的な調節因子の効果も求められました。したがって、Twist1発現は、高グルコースの存在下で胚の培養に続くmRNAとタンパク質レベルの両方で上方制御されているように見えました。 結論:私たちの研究は、胚の初期段階での動的なねじれ局在化を明らかにしました。結果は、系統の分離、hatch化、および胚盤胞における系統の分離、hatch化、移植のプロセスにおけるtwist1の潜在的な役割の観点から議論されています。
PURPOSE: The purpose of the present study is to understand Twist-related protein 1 (Twist1) spatiotemporal expression patterns and functions during early embryo development. METHODS: We performed whole-mount double immunofluorescence staining and reverse transcription (RT)-PCR analysis of the Twist1 protein and gene throughout the preimplantation development in mice. RESULTS: We determined that after compaction, the expression of Twist1 becomes developmentally differentiated and targeted in the inner cells of embryos. In blastocysts at E4.5, uniform staining of the inner cell mass was apparent, and it had been gradually translocated to the nucleus of hatched embryonic cells at E4.75. Furthermore, the effect of potential regulators of Twist on its expression level during blastocyst development was also sought. Accordingly, Twist1 expression appeared to be upregulated in both mRNA and protein level following culture of embryos in the presence of high glucose. CONCLUSIONS: Our study revealed the dynamic Twist localization within the early stage of embryo. The results are discussed in terms of potential roles of Twist1 in the processes of lineage segregation, hatching, and implantation in post-compaction embryos and in blastocysts.
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