雌マウスの乳腺全体における上皮細胞の増殖を評価するための便利な方法

乳腺（Mg）は、エストロゲンの強力なマイトジェン効果を含む内分泌の手がかりに応じて、思春期に乳管ネットワークを急速に拡大します。乳腺上皮細胞の増殖は、乳腺末端にある末端端芽が細胞分裂の主要な部位である空間的に特徴的な方法で発生します。ここでは、5-エチニル-2'-デオキシウリジンの組織化学的検出を使用して、標準的な曲線ベースのデータデコンボリューション技術と組み合わせて、広範なフィールド上部微量微小顕微鏡を介して増殖を半定量的に測定するために、マウス全体のMgの上皮細胞増殖を空間的に評価するための比較的高いスループットアプローチを提示します。このアプローチは、コンピューター支援画像分析を利用した共焦点画像からラベル付き核をカウントするという「ゴールドスタンダード」に対して検証されました。私たちの方法は、108時間後に低用量エストロゲンに対する有意で空間的に可変的な増殖反応を記述するのに十分な感度が証明されました。この柔軟な方法は、マウスMgの上皮細胞増殖に関する空間情報を取得するためのタイムリーで経済的なアプローチを提示します。

The mammary glands (MG) undergo rapid expansion of the ductal network during puberty in response to endocrine cues including the potent mitogenic effects of estrogen. The proliferation of mammary epithelial cells occurs in a spatially distinctive manner, where terminal end buds located at the ductal termini are the primary site of cell division. Here, we present a relatively high throughput approach to spatially assess epithelial cell proliferation in whole mouse MG using histochemical detection of 5-ethynyl-2'-deoxyuridine in conjunction with a standard curve-based data deconvolution technique to semiquantitatively measure proliferation via wide-field epifluorescent microscopy. This approach was validated against the "gold standard" of counting labeled nuclei from confocal images utilizing computer-assisted image analysis. Our method proved sensitive enough to describe the significant and spatially variable proliferative response to low-dose estrogen after 108 hours. This flexible method presents a timely and economical approach to obtaining spatial information regarding epithelial cell proliferation in the mouse MG.