生化学プロセスのための時間分解蛍光共鳴エネルギー伝達[TR-FRET]アッセイ

時間分解蛍光共鳴エネルギー移動（TR-FRET）は、生化学プロセスにおける分子相互作用の分析を可能にする蛍光ベースの技術です。TR-FRETの原理は、ドナーとアクセプター分子間の時間分解蛍光（TRF）測定と蛍光共鳴エネルギー移動（FRET）に基づいています。FRET信号を生成するには、ドナーとアクセプター分子がスペクトルのオーバーラップを示し、互いに近接して適切な双極子配向を表示する必要があります。特定の信号は、ドナーとアクセプター分子の相互作用を介して目的の分子から取得されます。TR-FRET技術は、キナーゼアッセイ、細胞シグナル伝達経路、タンパク質間相互作用、DNAタンパク質相互作用、および受容体リガンド結合の研究に広く使用されています。TR-FRETにはさまざまな妥当性アプリケーションがあります。このレビューには、2つの異なるサンプルプロトコルが要約されています。

Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer (TR-FRET) is a fluorescence based technique which enables the analysis of molecular interactions in biochemical processes. Principle of TR-FRET is based on time-resolved fluorescence (TRF) measurement and fluorescence resonance energy transfer (FRET) between donor and acceptor molecules. To generate FRET signal, donor and acceptor molecules must show spectral overlap and should be in close proximity to each other and display suitable dipole orientation. The specific signal is acquired from molecules of interest via interactions of donor and acceptor molecules. TR-FRET technique is widely used for studying kinase assays, cellular signaling pathways, protein-protein interactions, DNA-protein interactions, and receptor-ligand binding. There are various propriety applications of TR-FRET. Two different sample protocols are summarized in this review.