CDRの移植を超えて：抗ミョスタチン抗体のフレームワークとCDR領域の構造誘導性ヒューマン化

抗体は、抗原、長い半減期、エフェクター機能相互作用、および優れた製造可能性に特異性を提供する生物療法の重要なクラスです。発達の主要な制限となる可能性のある非ヒト由来抗体の免疫原性は、相補性決定領域（CDR）を介して人間のアクセプターフレームワークを移植することにより、人間化によって部分的に克服されています。ただし、CDR地域における外国コンテンツの保持は、依然として潜在的な免疫原性責任です。ここでは、伝統的なCDRグラフトの2段階プロセスを人間のアクセプターフレームワークに利用した抗ミオスタチン抗体のヒト化と、その後、CDRグラフト抗体のマウス含有量をさらに減らすための構造誘導アプローチが続きます。これを達成するために、ミオスタチンの共結晶構造をキメラ（タンパク質データバンク（PDB）ID 5F3B）およびCDRグラフトした抗ミオスタチン抗体（PDB ID 5F3H）を使用して、構造的に重要なCDR残基として構造的に重要なCDR残基を計算することができます。同様に、抗原と重要な接触をしている人たち。構造ベースの合理的設計により、CDRグラフト抗体のさらなる生殖臨床が可能になり、抗原結合に影響を与えることなく抗体のマウス含有量が減少しました。全体的な「人間性」は、軽い鎖変数領域と重い鎖の両方の領域の両方で増加しました。

Antibodies are an important class of biotherapeutics that offer specificity to their antigen, long half-life, effector function interaction and good manufacturability. The immunogenicity of non-human-derived antibodies, which can be a major limitation to development, has been partially overcome by humanization through complementarity-determining region (CDR) grafting onto human acceptor frameworks. The retention of foreign content in the CDR regions, however, is still a potential immunogenic liability. Here, we describe the humanization of an anti-myostatin antibody utilizing a 2-step process of traditional CDR-grafting onto a human acceptor framework, followed by a structure-guided approach to further reduce the murine content of CDR-grafted antibodies. To accomplish this, we solved the co-crystal structures of myostatin with the chimeric (Protein Databank (PDB) id 5F3B) and CDR-grafted anti-myostatin antibody (PDB id 5F3H), allowing us to computationally predict the structurally important CDR residues as well as those making significant contacts with the antigen. Structure-based rational design enabled further germlining of the CDR-grafted antibody, reducing the murine content of the antibody without affecting antigen binding. The overall "humanness" was increased for both the light and heavy chain variable regions.