イソリキリチゲニンは、IκBキナーゼの共有結合システイン46を介してヒトTリンパ球の活性化を抑制します

精密な個別化医療の効果的な実践には、薬物の分子メカニズムをより正確に理解する必要があります。したがって、天然源に由来する薬物の結合部位を特定する必要があります。この研究では、in vitroおよびin vivoでのヒトTリンパ球の活性化について、植物フラボノイドであるイソリキリチゲニン（2 '、4'、4-トリヒドロキシチャルコン; ILG）の抑制効果と基礎となるメカニズムを調査しました。結果は、ILGがIκBαのリン酸化と分解、NF-κB核転座およびIKKβ活性を抑制することにより、ヒトT細胞の活性化を用量依存的に抑制したことを示した。分子ドッキングの結果は、システイン46（CYS-46）がおそらくIKKβのILGの結合部位であると予測し、この予測は競合アッセイとキナーゼアッセイによって検証されています。in vivoでこの化合物の結合部位をさらに検証するために、IKKβC46Aトランスジェニック（IKKβC46A）マウスが生成されました。ILGは、IKKβの野生型（IKKβWT）の同腹型よりもホモ接合IKKKC46Aマウスで遅延型過敏症（DTH）よりも強力な免疫抑制効果があり、ILGがトランスジェニックMICEにおけるCYS-46の変異による炎症による炎症を有意に抑制できないことを示唆しています。まとめて、我々の発見は、ILGがIKKβCys46に直接結合することにより、in vivoおよびin vitroでのT細胞の活性化を阻害したことを示しています。

The efficacious practice of precision personalized medicine requires a more exact understanding of the molecular mechanisms of drug, hence then it is necessary to identify the binding site of the drugs derived from natural sources. In the study, we investigated the suppressive effect and underlying mechanism of isoliquiritigenin (2',4',4-trihydroxychalcone; ILG), a phyto-flavonoid, on human T lymphocyte activation in vitro and in vivo. The results showed that ILG dose-dependently suppressed human T cell activation via suppressing IκBα phosphorylation and degradation, NF-κB nuclear translocation and IKKβ activity. Molecular docking results predicted that cysteine 46 (Cys-46) is probably the binding site of ILG on IKKβ, and this prediction has been validated by competition assay and kinase assay. To further verify the binding site of this compound in vivo, IKKβC46A transgenic (IKKβC46A) mice were generated. We found that ILG had a less potent immune-suppressive effect in homozygous IKKβC46A mice than IKKβ wild type (IKKβ wt) littermates with the delay-type hypersensitivity (DTH), suggesting that ILG cannot significantly suppress the inflammation due to the mutation of Cys-46 in the transgenic mice. Collectively, our findings indicate that the ILG inhibited T cell activation in vivo and in vitro via directly binding to IKKβ Cys46.