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背景：転写中間因子因子1（TIF1）およびMI-2に対する自己抗体は、皮膚筋炎（DM）患者で選択的に検出されます。これらの抗体を容易に測定するには、信頼できるELISAシステムの開発が必要です。 目的：この研究は、抗TIF1γおよび抗MI-2β抗体（ABS）の酵素結合免疫吸着アッセイ（ELISA）を確立し、それらの有用性を評価することを目的としています。 方法：血清サンプルは、クラシックDMの104人の患者、68人の臨床的粘液症DM（CADM）、および70人の患者から入手し、ポリミーシトスを伴い、日本の8つの医療センターでフォローアップされました。他の結合組織疾患（CTD）および123人の健康な個人の190人の患者からの血清サンプルも評価されました。血清抗体レベルは、バキュロウイルス発現システムによって産生された全長TIF1γまたはMI-2βタンパク質でコーティングされたELISAで検査されました。交差反応性を評価するために、突然変異の有無にかかわらず、部分的長さのMI-2βタンパク質が生成され、反応性について検査されました。 結果：免疫沈降アッセイと比較すると、抗TIF1γABELISAは100％の感度と100％特異性を示し、抗MI-2βABELISAは100％の感度と99.6％の特異性を示しました。抗TIF1γABは30（28.8％）で古典的なDMで陽性であり、CADMで4（5.9％）で、14（13.5％）が古典的なDMで陽性でしたが、CADMでは抗MI-2βABに対して陽性でした。30人の抗TIF1γAB陽性DM患者のうち、23人（67.6％）が悪性腫瘍でした。抗MI-2βAB陽性血清サンプルは、植物のホメオドメインにシステインを含む相同アミノ酸配列により、TIF1γタンパク質との適度な交差反応性を示しました。 結論：現在の研究は、抗TIF1γおよび抗MI-2βABSの新たに確立されたELISAの有用性を示しています。
背景：転写中間因子因子1（TIF1）およびMI-2に対する自己抗体は、皮膚筋炎（DM）患者で選択的に検出されます。これらの抗体を容易に測定するには、信頼できるELISAシステムの開発が必要です。 目的：この研究は、抗TIF1γおよび抗MI-2β抗体（ABS）の酵素結合免疫吸着アッセイ（ELISA）を確立し、それらの有用性を評価することを目的としています。 方法：血清サンプルは、クラシックDMの104人の患者、68人の臨床的粘液症DM（CADM）、および70人の患者から入手し、ポリミーシトスを伴い、日本の8つの医療センターでフォローアップされました。他の結合組織疾患（CTD）および123人の健康な個人の190人の患者からの血清サンプルも評価されました。血清抗体レベルは、バキュロウイルス発現システムによって産生された全長TIF1γまたはMI-2βタンパク質でコーティングされたELISAで検査されました。交差反応性を評価するために、突然変異の有無にかかわらず、部分的長さのMI-2βタンパク質が生成され、反応性について検査されました。 結果：免疫沈降アッセイと比較すると、抗TIF1γABELISAは100％の感度と100％特異性を示し、抗MI-2βABELISAは100％の感度と99.6％の特異性を示しました。抗TIF1γABは30（28.8％）で古典的なDMで陽性であり、CADMで4（5.9％）で、14（13.5％）が古典的なDMで陽性でしたが、CADMでは抗MI-2βABに対して陽性でした。30人の抗TIF1γAB陽性DM患者のうち、23人（67.6％）が悪性腫瘍でした。抗MI-2βAB陽性血清サンプルは、植物のホメオドメインにシステインを含む相同アミノ酸配列により、TIF1γタンパク質との適度な交差反応性を示しました。 結論：現在の研究は、抗TIF1γおよび抗MI-2βABSの新たに確立されたELISAの有用性を示しています。
BACKGROUND: Autoantibodies against transcriptional intermediary factor 1 (TIF1) and Mi-2 are selectively detected in patients with dermatomyositis (DM). To measure these antibodies readily, the development of reliable ELISA systems has been needed. OBJECTIVE: This study aimed to establish enzyme-linked immunosorbent assays (ELISAs) for anti-TIF1γ and anti-Mi-2β antibodies (Abs) and to assess their utility. METHODS: Serum samples were obtained from 104 patients with classic DM, 68 with clinically amyopathic DM (CADM) and 70 with polymyositis, who were followed up at 8 medical centers across Japan. Serum samples from 190 patients with other connective tissue diseases (CTDs) and 123 healthy individuals were also assessed. Serum antibody levels were examined by ELISAs coated with full-length TIF1γ or Mi-2β proteins produced by a baculovirus expression system. To assess the cross-reactivity, partial-length Mi-2β proteins with or without mutations were produced and examined for reactivity. RESULTS: When compared with immunoprecipitation assay, anti-TIF1γ Ab ELISA showed 100% sensitivity and 100% specificity, while anti-Mi-2β Ab ELISA showed 100% sensitivity and 99.6% specificity. Anti-TIF1γ Ab was positive in 30 (28.8%) with classic DM and 4 (5.9%) with CADM, whereas 14 (13.5%) with classic DM, but none with CADM, were positive for anti-Mi-2β Ab. Of 30 anti-TIF1γ Ab-positive DM patients, 23 (67.6%) had malignancy. Anti-Mi-2β Ab-positive serum samples exhibited modest cross-reactivity with the TIF1γ protein due to the homologous amino acid sequence containing cysteines in their plant homeodomains. CONCLUSION: The current study demonstrates the utility of newly established ELISAs for anti-TIF1γ and anti-Mi-2β Abs, which can serve as easier detection systems for routine testing.
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