化学イオン化ガスクロマトグラフィー/質量分析による選択イオンモニタリングを使用した、ヒト尿中の n-ヘキサノイルグリシン、3-フェニルプロピオニルグリシン、およびスベリルグリシンの安定同位体希釈分析

遺伝性中鎖アシルCoAデヒドロゲナーゼ（MCAD）欠損症の診断のために、尿中のn-ヘキサノイルグリシン、3-フェニルプロピオニルグリシンおよびスベリルグリシンを正確に測定するためのガスクロマトグラフィー/質量分析法について説明します。これらのアシルグリシンは、MCAD 欠損症患者の尿から以前に検出されていましたが、適切な分析方法がなかったため、その診断値は不明でした。n-ヘキサノイル(1,2-13C)グリシン、3-フェニルプロピオニル(2-13C,15N)グリシン、およびスベリル(2-13C,15N)グリシンを合成し、内部標準として使用しました。アンモニア化学イオン化を利用して、選択されたイオンをモニタリングして定量化するための強力な [M + H]+ イオンを生成しました。全体の手順は高速で、低分解能のガスクロマトグラフィー/質量分析システムで実行でき、3 桁の範囲 (0.0167 ～ 16.7 マイクログラム/ml) にわたって正確な結果が得られます。この方法を使用した21人のMCAD欠損患者からの54の尿サンプルとさまざまな対照サンプルの分析結果から、n-ヘキサノイルグリシンと3-フェニルプロピオニルグリシンはこの疾患の診断に非常に適しているが、スベリルグリシンは特異性が低いことが判明した。

We describe a gas chromatographic/mass spectrometric method for the accurate determination of n-hexanoylglycine, 3-phenylpropionylglycine and suberylglycine in urine for the diagnosis of hereditary medium-chain acyl-CoA dehydrogenase (MCAD) deficiency. These acylglycines had previously been detected in urine from patients with MCAD deficiency, but their diagnostic values were unknown because of a lack of appropriate analytical methods. n-Hexanoyl(1,2-13C)glycine, 3-phenylpropionyl(2-13C,15N)glycine and suberyl(2-13C,15N)glycine were synthesized and used as internal standards. Ammonia chemical ionization was utilized to generate intense [M + H]+ ions for selected-ion monitoring quantification. The whole procedure is fast and can be performed by a low-resolution gas chromatographic/mass spectrometric system, giving accurate results over a range of three orders of magnitude (0.0167-16.7 micrograms/ml). The results from the analyses of 54 urine samples from 21 MCAD-deficient patients and various control samples using this method established that n-hexanoyglycine and 3-phenylpropionylglycine were highly diagnostic for this disease, while suberylglycine was found less specific.