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BJU international2017Feb01Vol.119issue(2)

勃起不全および臨床ホスホジエステラーゼ5型阻害剤不全の患者のコーパス海綿体組織の弛緩に対するRhoキナーゼ阻害剤Y-27632およびバルデナフィルの付加効果

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文献タイプ:
  • Journal Article
概要
Abstract

目的:健康なヒト脳腫と比較して重度の勃起不全(ED)の患者のコーパス海綿体におけるRho/rho関連プロテインキナーゼ(ROCK)経路の発現を評価し、2つのRhoキナーゼ阻害剤の機能効果をテストするために(RKIS)ホスホジエステラーゼ5型阻害剤(PDE5IS)に反応しなかった重度のED患者の勃起組織に関する。 患者と方法:陰茎補綴物を受けた男性からの同意後に、ヒトcor虫のサンプルが得られました(臓器浴実験ではn = 7、定量的PCR [QPCR]の場合はn = 17)。強力なコントロール被験者(n = 5)は、陰茎針生検を受けました。QPCRは、RhoAおよびROCKサブタイプ1および2の発現のために実施されました。ED患者のCorpus洞窟で岩石およびα平滑筋アクチン(αSMA)に対する免疫組織化学染色を実施しました。組織ストリップをフェニレフリンで前巻き、1μMのPDE5IヴァルデナフィルまたはDMSO(コントロール)とインキュベートしました。その後、RKIS AzaindoleまたはY-27632の濃度の増加が添加され、組織の弛緩が定量化されました。 結果:ROCK1の発現は変更されていませんでしたが(P> 0.05)、ROCK2(P <0.05)は、対照と比較してED患者で有意に上方制御されていました。Rock1およびRock2タンパク質はαSMAと共局在し、海綿状の平滑筋細胞および/または筋線維芽細胞におけるこのキナーゼの存在を確認しました。DMSOとのインキュベーション後、10μMアザンドールと10μMY-27632は、49.5±7.42%(車両と比較した場合はP = 0.1470)および85.9±10.3%(それぞれ車両と比較した場合はP = 0.0016)で緩和された先入部組織を緩和しました。1μMのヴァルデナフィルとのプレインキュベーション後に、ヒトcor骨の弛緩に対する付加的な効果が見られました。 結論:RKI Y-27632は、重度のEDの患者の組織筋におけるCorpus corpus corpus corpusの顕著な弛緩を引き起こします。VardenafilとY-27632の加法効果は、Rho-Kinaseとホスホジエステラーゼ5型の阻害を組み合わせた阻害が、重度のEDのための有望な経口投与治療である可能性があることを示しています。

目的:健康なヒト脳腫と比較して重度の勃起不全(ED)の患者のコーパス海綿体におけるRho/rho関連プロテインキナーゼ(ROCK)経路の発現を評価し、2つのRhoキナーゼ阻害剤の機能効果をテストするために(RKIS)ホスホジエステラーゼ5型阻害剤(PDE5IS)に反応しなかった重度のED患者の勃起組織に関する。 患者と方法:陰茎補綴物を受けた男性からの同意後に、ヒトcor虫のサンプルが得られました(臓器浴実験ではn = 7、定量的PCR [QPCR]の場合はn = 17)。強力なコントロール被験者(n = 5)は、陰茎針生検を受けました。QPCRは、RhoAおよびROCKサブタイプ1および2の発現のために実施されました。ED患者のCorpus洞窟で岩石およびα平滑筋アクチン(αSMA)に対する免疫組織化学染色を実施しました。組織ストリップをフェニレフリンで前巻き、1μMのPDE5IヴァルデナフィルまたはDMSO(コントロール)とインキュベートしました。その後、RKIS AzaindoleまたはY-27632の濃度の増加が添加され、組織の弛緩が定量化されました。 結果:ROCK1の発現は変更されていませんでしたが(P> 0.05)、ROCK2(P <0.05)は、対照と比較してED患者で有意に上方制御されていました。Rock1およびRock2タンパク質はαSMAと共局在し、海綿状の平滑筋細胞および/または筋線維芽細胞におけるこのキナーゼの存在を確認しました。DMSOとのインキュベーション後、10μMアザンドールと10μMY-27632は、49.5±7.42%(車両と比較した場合はP = 0.1470)および85.9±10.3%(それぞれ車両と比較した場合はP = 0.0016)で緩和された先入部組織を緩和しました。1μMのヴァルデナフィルとのプレインキュベーション後に、ヒトcor骨の弛緩に対する付加的な効果が見られました。 結論:RKI Y-27632は、重度のEDの患者の組織筋におけるCorpus corpus corpus corpusの顕著な弛緩を引き起こします。VardenafilとY-27632の加法効果は、Rho-Kinaseとホスホジエステラーゼ5型の阻害を組み合わせた阻害が、重度のEDのための有望な経口投与治療である可能性があることを示しています。

OBJECTIVES: To evaluate the expression of the Rho/Rho-associated protein kinase (ROCK) pathway in the corpus cavernosum of patients with severe erectile dysfunction (ED) compared with healthy human corpus cavernosum, and to test the functional effects of two Rho kinase inhibitors (RKIs) on erectile tissue of patients with severe ED, which did not respond to phosphodiesterase type 5 inhibitors (PDE5Is). PATIENTS AND METHODS: Human corpus cavernosum samples were obtained after consent from men undergoing penile prosthesis implantation (n = 7 for organ bath experiments, n = 17 for quantitative PCR [qPCR]). Potent control subjects (n = 5) underwent penile needle biopsy. qPCR was performed for the expression of RhoA and ROCK subtypes 1 and 2. Immunohistochemistry staining against ROCK and α smooth muscle actin (αSMA) was performed on the corpus cavernosum of patients with ED. Tissue strips were precontracted with phenylephrine and incubated with 1 μm of the PDE5I vardenafil or with DMSO (control). Subsequently, increasing concentrations of the RKIs azaindole or Y-27632 were added, and relaxation of tissue was quantified. RESULTS: The expression of ROCK1 was unchanged (P > 0.05), while ROCK2 (P < 0.05) was significantly upregulated in patients with ED compared with controls. ROCK1 and ROCK2 protein colocalized with αSMA, confirming the presence of this kinase in cavernous smooth muscle cells and/or myofibroblasts. After incubation with DMSO, 10 μm azaindole and 10 μm Y-27632 relaxed precontracted tissues with 49.5 ± 7.42% (P = 0.1470 when compared with vehicle) and 85.9 ± 10.3% (P = 0.0016 when compared with vehicle), respectively. Additive effects on relaxation of human corpus cavernosum were seen after preincubation with 1 μm vardenafil. CONCLUSION: The RKI Y-27632 causes a significant relaxation of corpus cavernosum in tissue strips of patients with severe ED. The additive effect of vardenafil and Y-27632 shows that a combined inhibition of Rho-kinase and phosphodiesterase type 5 could be a promising orally administered treatment for severe ED.

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