リポ多糖は、Mlo-Y4細胞のRANKL遺伝子発現をアップレギュレートするERK1/2シグナル伝達経路の活性化を介してIL-6分泌を増加させます。

リポ多糖（LPS）は、さまざまなシグナル伝達経路を介して多数のサイトカインを含む骨吸収に重要な役割を果たします。RANKLとINTERLEUKIN（IL）-6は、骨のリモデリングに関与する2つの重要なサイトカインです。この研究の目的は、RANKLおよびIL-6遺伝子発現に対するLPSの効果、RANKLとIL-6の関係、およびIL-上の細胞外シグナル調節キナーゼ1/2（ERK1/2）の役割を評価することでした。MLO-Y4細胞のLPSによって誘導される6分泌。細胞は、異なる持続時間（0.5、1、1、2、4、および8時間、および0.5、1、1.5、2、および4で異なる濃度（1、10、100、500、および1000 ng/ml）でLPSによって刺激されました。H）、およびRANKLおよびIL-6のmRNA発現はPCRによって決定されました。異なる時点（0.5、1、1.5、2、および4時間）で100 ng/ml LPSが存在する場合、細胞内のIL-6分泌とERK1/2リン酸化は、それぞれELISAおよびウエスタンブロットによって決定されました。異なる時点（0.5、1、2、4、および8時間）で100 ng/mL LPSによってシミュレートされた細胞のSTAT3リン酸化は、ウエスタンブロットティングによって評価されました。LPSはRANKL発現を有意に上方制御し、ERK1/2経路を活性化してMlo-Y4細胞にIL-6 mRNA発現とタンパク質合成を誘導することがわかりました。ただし、IL-6の増加は、ERK1/2阻害剤U0126（10 µM）によるMLO-Y4細胞の前処理によってブロックされ、強化されたRANKLはSTAT3阻害剤S3I-20101（100 µM）によってブロックされました。我々の結果は、LPSがRANKLとIL-6の骨細胞発現を上方制御し、RANKLの増加はERK1/2経路を含むIL-6のアップレギュレーションに関連していることを示しています。

Lipopolysaccharide (LPS) plays an important role in bone resorption, which involves numerous cytokines through various signaling pathways. RANKL and interleukin (IL)-6 are two important cytokines that are involved in bone remodeling. The aim of this study was to evaluate the effect of LPS on RANKL and IL-6 gene expression, the relationship of RANKL and IL-6, and the role of extracellular signal-regulated kinases 1/2 (ERK1/2) on IL-6 secretion induced by LPS in MLO-Y4 cells. The cells were stimulated by LPS at different concentrations (1, 10, 100, 500, and 1000 ng/mL) for different durations (0.5, 1, 2, 4, and 8 h and 0.5, 1, 1.5, 2, and 4 h), and the mRNA expressions of RANKL and IL-6 were determined by PCR. In the presence of 100 ng/mL LPS at different time points (0.5, 1, 1.5, 2, and 4 h), IL-6 secretion and ERK1/2 phosphorylation in the cells were determined by ELISA and western blotting, respectively. STAT3 phosphorylation in cells simulated by 100 ng/mL LPS at different time points (0.5, 1, 2, 4, and 8 h) was assessed by western blotting. We found that LPS significantly up-regulated RANKL expression and activated the ERK1/2 pathway to induce IL-6 mRNA expression and protein synthesis in MLO-Y4 cells. However, the increased IL-6 was blocked by pre-treatment of MLO-Y4 cells with the ERK1/2 inhibitor U0126 (10 µM), and the enhanced RANKL was blocked by the STAT3 inhibitor S3I-201 (100 µM). Our results indicate that LPS up-regulates osteocyte expression of RANKL and IL-6, and the increased RANKL is associated with the up-regulation of IL-6, which involves the ERK1/2 pathway.