プロリルオリゴペプチダーゼ阻害は、アルファシヌクレインの過剰発現細胞培養におけるプロテアソーム阻害剤LactacyStinの毒性を減衰させます。

パーキンソン病（PD）の組織病理学的特徴であるレビー体は、不溶性および凝集したα-シヌクレイン（ASYN）および他の多くのタンパク質を含み、PD病因におけるタンパク質分解系の失敗の役割を提案しています。プロテアソーム機能障害は実際にPDに関連しており、Asynオリゴマーはプロテアソームとオートファジーを阻害することが示されています。私たちの最近の研究では、プロリルオリゴペプチダーゼ（PREP）の阻害剤が凝集を防ぎ、蓄積されたASYNのクリアランスを高めることができることが示されているため、PREP阻害がプロテアソーム阻害薬であるLactacystinによって誘導されるASYN凝集と毒性を克服できるかどうかを研究したいと考えました。ヒトA30PまたはA53T変異ASYNを過剰発現する細胞を、48HでLactacyStinおよびPREP-2047とIncubated kyp-2047でインキュベートしました。後に、細胞を分割し、アシン凝集とユビキチンの蓄積、細胞生存率、およびオートファジーマーカー（P62、Beclin1およびLC3BII）に対する1μMKYP-2047を伴うまたは伴わないラクタシスチンの効果を研究しました。KYP-2047は、非過剰発現コントロール細胞では、変異Asynの過剰発現細胞ではラクタシスタン誘発細胞死を減衰させることがわかりました。KYP-2047は、細胞生存率の結果に沿ったSDSに溶解性の高分子量ASYNオリゴマーを有意に減少させました。さらに、タンパク質蓄積マーカーP62の有意な減少はSDS画分で見られましたが、オートファゴソーム形成のマーカーであるLC3BIIが増加し、オートファジーの強化を示しています。私たちの結果は、シンクレイノパシーやその他のタンパク質凝集疾患に対する潜在的な薬物療法としてのPREP阻害剤の可能性をさらに強化します。

Lewy bodies, the histopathological hallmarks of Parkinson's disease (PD), contain insoluble and aggregated α-synuclein (aSyn) and many other proteins, proposing a role for failure in protein degradation system in the PD pathogenesis. Proteasomal dysfunction has indeed been linked to PD and aSyn oligomers have been shown to inhibit proteasomes and autophagy. Our recent studies have shown that inhibitors of prolyl oligopeptidase (PREP) can prevent the aggregation and enhance the clearance of accumulated aSyn, and therefore, we wanted to study if PREP inhibition can overcome the aSyn aggregation and toxicity induced by lactacystin, a proteasomal inhibitor. The cells overexpressing human A30P or A53T mutated aSyn were incubated with lactacystin and a PREP inhibitor, KYP-2047, for 48h. Theafter, the cells were fractioned, and the effects of lactacystin with/without 1μM KYP-2047 on aSyn aggregation and ubiquitin accumulation, cell viability and on autophagic markers (p62, Beclin1 and LC3BII) were studied. We found that KYP-2047 attenuated lactacystin-induced cell death in mutant aSyn overexpressing cells but not in non-overexpressing control cells. KYP-2047 reduced significantly SDS-insoluble high-molecular-weight aSyn oligomers that were in line with the cell viability results. In addition, significant reduction in protein accumulation marker, p62, was seen in SDS fraction while LC3BII, a marker for autophagosome formation, was increased, indicating to enhanced autophagy. Our results further streghten the possibilities for PREP inhibitors as a potential drug therapy against synucleinopathies and other protein aggregating diseases.