THY-1（CD90）陽性肝臓前駆細胞、肝臓、およびヒト肝臓から分離された非パルミン性肝細胞

肝臓の損傷に応じて、肝細胞、特に肝細胞は急速に増殖して肝臓の損傷を修復することができます。さらに、特定の状況下では、前駆細胞能力を備えた肝臓の居住細胞が肝臓細胞の増殖と分化に関与していることが示されました。げっ歯類の楕円形細胞として知られるこれらの肝臓前駆細胞（HPC）は、肝臓の脳腸周囲領域にあるヘリングの運河に由来しています。ヒトHPCに対して定義されたさまざまな細胞ニッチに関しては、CD34、C-KIT、OV-6、THY-1（CD90）などのこれらの細胞を識別するためにいくつかのマーカーが使用されています。後者は、再生の組織学的兆候を持つヒト肝臓組織のHPCで発現することが示されました。この章では、ヒト切除された肝臓組織からTHY-1陽性細胞を分離するための詳細な方法について説明します。一次ヒト肝細胞と非パルミン性細胞（NPC）を分離する手順に基づいて、このプロトコルを追加の酵素解離、ろ過、および遠心分離ステップに拡張しました。これにより、NPCの胆管細胞が濃縮された部分があり、そこからTHY-1（CD90）陽性細胞がMACS技術を使用したTHY-1陽性選択によって精製されました。ヒト肝臓切除からの双極性前駆細胞は、THY-1を使用して分離でき、異種移植のための肝臓居住者の前駆細胞を濃縮するための適切なツールであることが示されました。

In response to liver injury, hepatic cells, especially hepatocytes, can rapidly proliferate to repair liver damage. Additionally, it was shown that under certain circumstances liver resident cells with progenitor capabilities are involved in liver cell proliferation and differentiation. These hepatic progenitor cells (HPCs), known as oval cells in rodents, are derived from the canals of Hering, which are located in the periportal region of the liver. Regarding to different cell niches, which were defined for human HPCs, several markers have been used to identify these cells such as CD34, c-kit, OV-6, and Thy-1 (CD90). The latter was shown to be expressed on HPCs in human liver tissue with histological signs of regeneration. In this chapter we describe a detailed method for the isolation of Thy-1 positive cells from human resected liver tissue. Based on a procedure for isolating primary human hepatocytes and non-parenchymal cells (NPCs) we expanded this protocol to additional enzymatic dissociation, filtration, and centrifugation steps. This results in a bile duct cell enriched fraction of NPCs from which Thy-1 (CD90) positive cells were purified by Thy-1 positivity selection using MACS technique. Bipotential progenitor cells from human liver resections can be isolated using Thy-1 and was shown to be a suitable tool for the enrichment of liver resident progenitor cells for xenotransplantation.