新規E2糖タンパク質テトラマーはC型肝炎ウイルス特異的記憶B細胞を検出します

急性C型肝炎ウイルス（HCV）感染は、ほとんどの場合にウイルスの持続性が頂点に達します。エンベロープ糖タンパク質E1およびE2を認識するABSは、急性感染の後期段階で生成されますが、自発的なウイルスクリアランスへの寄与は議論の余地があります。急性HCV感染中の体液性反応の調査は、HCV特異的B細胞を直接識別および特徴付けることができないことによって制限されてきました。この研究では、E2糖タンパク質エクトドメイン（J6、遺伝子型2A株）の新規テトラマーの発達について説明します。HCV特異的クラススイッチメモリB細胞は、急性感染症の7人中3人の参加者で検出され、陽性サンプル（範囲0.16-0.67％）で平均頻度は0.63％、慢性感染症の7人中7人で検出されました。平均頻度は0.47％（範囲0.20-0.78％）。横断的研究では、E2テトラマー陽性集団は、31人の慢性感染者のうち28人で検出されました。2人の独立した参加者からソートされたE2固有のクラススイッチメモリBセルからのBCRの深いシーケンスは、クローン選択を示唆する集中的なレパートリーを明らかにしました。テトラマー特異的B細胞は、ナイーブB細胞と比較して歪んだCDR3長分布と変異頻度の増加を示しました。このBCRプロファイルは、クローンの拡大と親和性の成熟を示しています。E2 Tetramerは、感染した個人におけるまれなHCV特異的B細胞の特異的かつ高感度のex vivo特性評価を可能にし、研究者がHCV感染における体液性免疫をよりよく理解することができます。

Acute hepatitis C virus (HCV) infection culminates in viral persistence in the majority of cases. Abs that recognize the envelope glycoproteins E1 and E2 are generated during the late stages of acute infection, yet their contribution to spontaneous viral clearance remains controversial. Investigation of the humoral responses during acute HCV infection have been limited by the inability to directly identify and characterize HCV-specific B cells. In this study we describe the development of a novel tetramer of the E2 glycoprotein ectodomain (J6, genotype 2a strain), which allowed us to visualize E2-specific B cells longitudinally in the peripheral blood of HCV-infected individuals. HCV-specific class-switched memory B cells were detected in 3 out of 7 participants during late acute infection, with a mean frequency of 0.63% for positive samples (range 0.16-0.67%) and in 7 out of 7 participants with chronic infection with a mean frequency of 0.47% (range 0.20-0.78%). In a cross-sectional study, E2 tetramer positive population was detected in 28 out of 31 chronically infected individuals. Deep sequencing of the BCR from E2-specific class-switched memory B cells sorted from two independent participants revealed a focused repertoire suggestive of clonal selection. Tetramer-specific B cells exhibited skewed CDR3 length distribution and increased mutation frequency compared with naive B cells. This BCR profile is indicative of clonal expansion and affinity maturation. E2 tetramer allows for specific and sensitive ex vivo characterization of rare HCV-specific B cells in infected individuals, and will enable researchers to gain a better understanding of humoral immunity in HCV infection.