ツニカマイシン誘発性小胞体ストレスは、ヒト網膜色素上皮細胞におけるペントラキシン3の発現を上方制御する

目的：チニカマイシン誘発性小胞体（ER）ストレスに応じて長いペントラキシン3（PTX3）の産生を調査し、ERストレス関連細胞死におけるその役割を調査するために、PTX3発現は、ヒト網膜色素上皮細胞株、Arpeeで評価されました。-19。 方法：ARPE-19細胞におけるPTX3産生は、酵素結合免疫吸着剤アッセイによるチニカマイシン治療の非存在下または存在下で分析されました。PTX3タンパク質およびmRNAレベルは、それぞれウエスタンブロット分析とリアルタイム逆転写 - ポリメラーゼ連鎖反応を使用して推定されました。CCAAT-エンハンサー結合タンパク質相同タンパク質（CHOP）およびARPE-19細胞生存率のタンパク質およびmRNAレベルは、コントロールまたはPTX3小ヘアピンRNA（shRNA）を超えたARPE-19細胞におけるチュニカマイシン誘発ERストレスの存在下で測定されました。 結果：PTX3のタンパク質レベルとmRNAレベルは、チニカマイシン治療により有意に増加することがわかった。PTX3産生は、コントロールshRNAトランスフェクト細胞と比較して、イノシトール要求酵素1αSHRNAトランスフェクトARPE-19細胞で有意に減少しました。さらに、NF-κB阻害剤による前処理は、チニカマイシン誘発PTX3産生を廃止しました。PTX3 shRNAトランスフェクトARPE-19細胞のツニカマイシン誘発ERストレス下で、細胞生存率と長期のタンパク質とCHOPのmRNA発現の低下が観察されました。 結論：これらの結果は、Tunicamycin誘発ERストレスの存在下でPTX3の産生が増加したことを示唆しています。したがって、PTX3は、ヒト網膜色素上皮細胞におけるERストレス誘発細胞死の重要なプロテクターである可能性があります。イノシトール要求酵素1αおよびNF-κBシグナル伝達経路は、網膜におけるPTX3発現の調節の潜在的な標的として機能する可能性があります。したがって、PTX3発現におけるそれらの役割をさらに調査する必要があります。

PURPOSE: To investigate the production of long pentraxin 3 (PTX3) in response to tunicamycin-induced endoplasmic reticulum (ER) stress and its role in ER stress-associated cell death, PTX3 expression was evaluated in the human retinal pigment epithelial cell line, ARPE-19. METHODS: PTX3 production in ARPE-19 cells was analyzed in the absence or presence of tunicamycin treatment by enzyme-linked immunosorbent assay. PTX3 protein and mRNA levels were estimated using western blot analysis and real-time reverse transcription-polymerase chain reaction, respectively. Protein and mRNA levels of CCAAT-enhancer-binding protein homologous protein (CHOP) and ARPE-19 cell viability were measured in the presence of tunicamycin-induced ER stress in control or PTX3 small hairpin RNA (shRNA)-transfected ARPE-19 cells. RESULTS: The protein and mRNA levels of PTX3 were found to be significantly increased by tunicamycin treatment. PTX3 production was significantly decreased in inositol-requiring enzyme 1α shRNA-transfected ARPE-19 cells compared to control shRNA-transfected cells. Furthermore, pretreatment with the NF-κB inhibitor abolished tunicamycin-induced PTX3 production. Decreased cell viability and prolonged protein and mRNA expression of CHOP were observed under tunicamycin-induced ER stress in PTX3 shRNA transfected ARPE-19 cells. CONCLUSIONS: These results suggest that PTX3 production increased in the presence of tunicamycin-induced ER stress. Therefore, PTX3 could be an important protector of ER stress-induced cell death in human retinal pigment epithelial cells. Inositol-requiring enzyme 1α and the NF-κB signaling pathway may serve as potential targets for regulation of PTX3 expression in the retina. Therefore, their role in PTX3 expression needs to be further investigated.