カフェインおよび過剰な水摂取による尿中プロテオームの生理学的変化

背景：尿中プロテオミクス分野では、尿プロテオームの日中の変動と生理学的変化が示唆されています。しかし、明確な証拠は実証されていません。したがって、本研究は、生理学的刺激、すなわちカフェイン摂取と過剰な水飲料による尿中プロテオームの変化を定義することを目的としています。どちらも生理学的利尿を引き起こします。 方法：尿サンプルは、3つの異なる条件下で30人の健康な個人から収集されました。（i）コントロールとしての朝の空白。（ii）一杯のコーヒーを飲んだ後。（iii）20分以内に1 Lの水を飲んだ後。その後、差次的に排泄されたタンパク質を2-DEプロテオミクスアプローチによって分析し、ウエスタンブロッティングとELISAによって検証されました。 結果：スポットマッチング、定量的強度分析、およびANOVAに続いて、Tukeyの事後複数の比較とBonferroni補正により、3つの異なる条件の中で5つのタンパク質スポットのレベルの有意差が明らかになりました。これらのタンパク質は、四重極時間の質量分析（Q-TOF MS）および/またはMS/MS分析によって同定されました。鎖。これらの中で、免疫グロブリンのレベルの低下は、ウエスタンブロッティングとELISAによって成功裏に検証されました。 結論：これらのデータは、カフェインの摂取と過剰な水飲料がいくつかのタンパク質の尿中排泄に影響を及ぼし、尿中プロテオーム分析に影響を与える可能性があることを示しています。

BACKGROUND: Diurnal variations and physiologic changes of urinary proteome have been suggested in the urinary proteomics field. However, no clear evidence has been demonstrated. The present study thus aimed to define changes in urinary proteome by physiological stimuli, i.e. caffeine intake and excessive water drinking, both of which cause physiologic diuresis. METHODS: Urine samples were collected from 30 healthy individuals under three different conditions: (i) morning void as the control; (ii) after drinking a cup of coffee; and (iii) after drinking 1 L of water within 20 min. Thereafter, differentially excreted proteins were analyzed by 2-DE proteomics approach and validated by Western blotting and ELISA. RESULTS: Spot matching, quantitative intensity analysis, and ANOVA followed by Tukey's post-hoc multiple comparisons and the Bonferroni correction revealed significant differences in levels of five protein spots among three different conditions. These proteins were identified by quadrupole time-of-flight mass spectrometry (Q-TOF MS) and/or MS/MS analyses as kininogen 1 isoform 3, β-actin, prostaglandin D synthase (PGDS), fibrinogen α-chain and immunoglobulin light chain. Among these, the decreased level of immunoglobulin was successfully validated by Western blotting and ELISA. CONCLUSIONS: These data indicated that caffeine intake and excessive water drinking could affect urinary excretion of some proteins and may affect urinary proteome analysis.