[日常的な微生物学研究所におけるPseudomonas luteolaの正確な診断：2つの分離株の際に]

以前はクリソモナス・ルテオラとして知られていたPseudomonas luteola。グラム陰性、非発酵、好気性、運動性、非胞子形成菌です。土壌、水、その他の湿った環境の苗木として頻繁に発見され、根底にある医学的障害または留置カテーテルの患者の日和見病原体です。それは、菌血症、敗血症、敗血症性関節炎、髄膜炎、心内膜炎、腹膜炎の珍しい原因として報告されています。したがって、この希少種の早期かつ正確な同定は、治療にとって重要であり、p.luteola感染の疫学に関する情報を提供するためにも重要です。このレポートは、大学病院の医療微生物学研究所の2つのケースで分離と識別時に、臨床サンプルにおけるp.luteolaの正確な識別に注意を引くことを目的としていました。2011年2月、慢性閉塞性肺疾患、冠動脈疾患、および非形質性貧血を伴う66歳の男性が、進行性呼吸困難のために病院に入院しました。再発性胸水の理由により、入院の20日目に胸部チューブが挿入されました。黄色ブドウ球菌およびしわが寄った粘着性の黄色のコロニーを含む非発酵グラム陰性菌（NFGNB）は、胸部チューブの挿入後9日目に得られた胸水サンプルから分離されました。2012年2月、急性肺の悪化の兆候や症状がなかった7歳の男性嚢胞性線維症患者が、日常的なコントロールのために病院に入院しました。この患者は、Pseudomonas aeruginosaとs.aureusと慢性的なコロニー形成を受け、この訪問で得られた彼のsputムサンプルは、P.aeruginosa、s.aureus、s.aureus、aspergillus fumigatus、およびしわのある粘着性の黄色のnfgnbの分離を明らかにしました。これらのNFGNBはどちらも、Phoenix Automated Microbial Identification System（BD Diagnostics、米国）によってp.luteolaとして特定されました。これら2つの分離株の微生物学的特性を評価するために、株はVitek MS（Biomerieux、フランス）およびMicroflex LT質量分析計（Bruker Daltonics、ドイツ）によってさらに分析されました。MALDI-TOF-MSシステムの両方が、分離株をp.luteolaおよび16S RRNA遺伝子シーケンス（ABI PRISM 3100、Applied Biosystems、USA）として特定しました。株は、オキシダーゼ陰性、カタラーゼ陽性、非発酵性であるしわのある粘着性のある黄色のコロニーを持っていました。コロニーのグラム染色塗抹標本は、おそらくバイオフィルムマトリックスに埋め込まれたグラム陰性菌のクラスターを明らかにしました。p.luteola株の抗生物質感受性をテストするための受け入れられた基準がないため、「他の非エンテロバクテリア科」（P. aeruginosa、Acinetobacter spp。、Burkholderia cepacia、B.malleiを除く非発酵細菌のCLSIによって決定される標準B.PseudomalleiおよびStenotrophomonas Maltophilia）を感受性試験に使用しました。グラジエントマイク法（e-test、バイオメリュー、フランス）は、分離株がゲンタマイシン、ピペラシリン - タゾバクタム、セフタジジム、セフェピム、メロペネム、コリスチン、レボフロキサシンの影響を受けやすいことを明らかにしました。深刻な症例でまれな病原体として特定されたp.luteolaの正確かつ迅速な識別は、介入プロセスが現在の医療慣行の増加により院内病原体としてより頻繁になる可能性が高いことが示唆されているため、非常に重要です。このレポートは、Phoenix自動化された表現型識別システム（BD Diagnostics、USA）と2つのMaldi-TOF-MSベースのシステム（Vitek MSおよびBruker Microflex LT Mass Spectrometer）がp.luteolaの正確な識別に成功したことを支持しました。

Pseudomonas luteola which was previously known as Chryseomonas luteola; is a gram-negative, non-fermentative, aerobic, motile, non-spore-forming bacillus. It is frequently found as a saprophyte in soil, water and other damp environments and is an opportunistic pathogen in patients with underlying medical disorders or with indwelling catheters. It has been reported as an uncommon cause of bacteremia, sepsis, septic arthritis, meningitis, endocarditis, and peritonitis. Thus, early and accurate identification of this rare species is important for the treatment and also to provide information about the epidemiology of P.luteola infections. This report was aimed to draw attention to the accurate identification of P.luteola in clinical samples, upon the isolation and identification in two cases in the medical microbiology laboratory of a university hospital. In February 2011, a 66-year-old man, with chronic obstructive pulmonary disease, coronary artery disease and aplastic anemia, was admitted to our hospital due to progressive dyspnea. A chest tube was inserted on the 20th day of admission by the reason of recurrent pleural effusion. Staphylococcus aureus and a non-fermentative gram-negative bacillus (NFGNB) with wrinkled, sticky yellow colonies were isolated from the pleural fluid sample obtained on the 9th day following the insertion of the chest tube. In February 2012, a 7-year-old male cystic fibrosis patient who had no signs and symptoms of acute pulmonary exacerbation was admitted to the hospital for a routine control. This patient had chronic colonization with Pseudomonas aeruginosa and S.aureus and his sputum sample obtained at this visit revealed isolation of P.aeruginosa, S.aureus, Aspergillus fumigatus and a wrinkled, sticky yellow NFGNB. Both of these NFGNB were identified as P.luteola by the Phoenix automated microbial identification system (BD Diagnostics, USA). To evaluate the microbiological characteristics of these two isolates, the strains were further analysed by VITEK MS (bioMerieux, France) and Microflex LT mass spectrometer (Bruker Daltonics, Germany). Both of the MALDI-TOF-MS systems identified the isolates as P.luteola and 16S rRNA gene sequencing (ABI PRISM 3100, Applied Biosystems, USA) also confirmed the identification. The strains had wrinkled, sticky yellow colonies which were oxidase-negative, catalase-positive and non-fermentative. The Gram stained smears of the colonies revealed clusters of gram-negative bacilli probably embedded into a biofilm matrix. Since there are no accepted standards for testing the antibiotic susceptibility of P.luteola strains, the standards determined by CLSI for "other non-Enterobacteriaceae" (non-fermentative bacteria excluding P.aeruginosa, Acinetobacter spp., Burkholderia cepacia, B.mallei, B.pseudomallei and Stenotrophomonas maltophilia) were used for the susceptibility testing. Gradient MIC method (E-Test, bioMerieux, France) revealed that the isolates were susceptible to gentamicin, piperacillin-tazobactam, ceftazidime, cefepime, meropenem, colistin and levofloxacin. Accurate and prompt identification of P.luteola which is identified as a rare pathogen in serious cases is of critical importance since it has been suggested that this organism is likely to become more frequent as a nosocomial pathogen since the interventional processes increase in current medical practice. This report supported that Phoenix automated phenotypic identification system (BD Diagnostics, USA) and the two MALDI-TOF-MS based systems (VITEK MS and Bruker Microflex LT mass spectrometer) were successfull in the accurate identification of P.luteola.