酵母GAL1-10 UAS領域はin vitroでヌクレオソームを容易に受け入れます

in vivoでの酵母GAL1-10遺伝子のUAS領域にヌクレオソームがないことが、ヒストンに対するこのDNAの固有の親和性、UASを含むDNAフラグメント、およびさまざまな量の隣接DNAがクロマチンに再構成されたことが原因であるかどうかをテストするために。制限酵素およびDNase I消化分析は、UASのDNAが再構成の消化から保護されることを示しています。したがって、ヌクレオソームはin vitroでUAS領域に集合することができます。UASおよび隣接するDNA領域の保護レベルは同等であり、さまざまなレベルのヌクレオソーム負荷にとどまり、UAS DNAがヌクレオソームを除外する傾向がないことを示唆しています。実際、DNase Iの結果は、UAS要素自体がヒストンを優先的に結合することを示唆しています。

To test if the absence of nucleosomes on the UAS region of the yeast GAL1-10 genes in vivo could be due to a low inherent affinity of this DNA for histones, DNA fragments containing the UAS and various amounts of flanking DNA were reconstituted into chromatin. Restriction enzyme and DNase I digestion analyses show that DNA in the UAS becomes protected against digestion in the reconstitutes. Thus, nucleosomes can assemble on the UAS region in vitro. The level of protection of the UAS and of the flanking DNA regions is comparable and remains so at various levels of nucleosome loading, suggesting that the UAS DNA has no tendency to exclude nucleosomes. In fact, DNase I results suggest that the UAS elements themselves preferentially bind histones.