リン脂質症誘導リスクを決定するための薬物スクリーニングにおける薬物リン酸相互作用に焦点を当てた親水性相互作用クロマトグラフィー

カチオン性両親媒性薬物（CAD）は、細胞および組織におけるリン脂質の過蓄積を誘導する可能性があります。薬物誘発性リン脂質症として知られているこの副作用は、CADの発生と臨床使用において問題がある場合があります。CADは一般に、疎水性と酸塩基の両方の相互作用を介してリン脂質と相互作用し、リン脂質に対するより大きな親和性を持つCADがより大きな誘導リスクを示すことが知られています。クロマトグラフィーアッセイシステムを開発して、リン脂質のCADとリン酸塩グループ間の酸塩基相互作用を考慮してリン脂質誘発性の可能性を予測するために、この研究で親水性相互作用クロマトグラフィー（HILIC）メソッドをテストしました。まず、詰められた材料にホスホコリン基を備えたPCヒリックカラムが使用されました。固定相との酸塩基またはその他の親水性相互作用は、塩基性薬物間で異なり、PC Hilicカラムへの保持はリン脂質症の誘導の可能性を正確に反映していませんでした。代替のヒリックアプローチとして、アミドカラムからのリン酸緩衝液によるCADの溶出をテストしました。溶出効果は、移動相の異なるリン酸含有量間の保持因子の比として表され、誘導電位と密接に相関しています。溶解効果と保持因子を逆相HPLCカラムに使用すると、リン脂質誘導薬は明らかに非誘導物質から識別されました。これらの結果は、提案されたクロマトグラフィーアプローチがリン脂質症誘導薬をスクリーニングできることを示唆しています。

Cationic amphiphilic drugs (CADs) can induce the hyperaccumulation of phospholipids in cells and tissues. This side effect, which is known as drug-induced phospholipidosis, is sometimes problematic in the development and clinical use of CADs. It is known that CADs generally interact with phospholipids via both hydrophobic and acid-base interactions, and CADs with the larger affinity to phospholipid exhibit the larger induction risk. To develop a chromatographic assay system to predict the phospholipidosis-inducing potential with considering the acid-base interaction between CAD and phosphate group of phospholipid, hydrophilic interaction chromatographic (HILIC) methods were tested in this study. First, a PC HILIC column with phosphocholine groups on a packed material was used. The acid-base or other hydrophilic interactions to the stationary phase differed among basic drugs, and retention to the PC HILIC column did not accurately reflect the induction potential of phospholipidosis. As an alternative HILIC approach, the elution of CADs with the phosphate buffer from an amide column was tested. The elution effect, which is expressed as ratio of retention factors between different phosphate content in the mobile phase, closely correlated with the induction potential. Using the elution effect and retention factor to a reversed-phase HPLC column, the phospholipidosis-inducing drugs were clearly discriminated from the non-inducers. These results suggest that the proposed chromatographic approach can screen phospholipidosis-inducing drugs.