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ポリ(a)+RNAおよびチューブリンmRNAは、アフリカツメガエル卵母細胞の周辺に局在し、減数分裂成熟中に非局在化されます。このRNAの非局在化は、細胞へのカルシウムイオンの侵入を減らす薬剤のインキュベーションによって引き起こされる可能性があります(例えば、塩化物やベラパミルなど)。これらの薬剤は通常、減数分裂の成熟を促進しますが、培地へのテオフィリンの添加は成熟を阻害しますが、非局在化を阻害します。減数分裂の成熟を誘発せずにカルシウム侵入を防ぐ操作(例:カルシウムを含まない緩衝液)も、RNAの局在化の破壊を引き起こすように示されています。さらに、細胞からの塩化物流出を減少させる操作(たとえば、塩化コリンとの外部塩化物イオン濃度を増加させる)により、減数分裂の成熟を誘発することなくポリ(A)+ RNAとチューブリンmRNAの局在が破壊されます。卵母細胞が刺激されて減数分裂の成熟を進めた後、アフリカツメガエル卵母細胞に存在するカルシウム依存性塩化物流出は消失します。カルシウムイオンの流入または塩化物イオンの流出の減少は、減数分裂成熟を誘発することなくポリ(A)+RNAとチューブリンmRNAの非局在化を誘導することを示しています。したがって、これらのイオンの膜貫通移動を減らすことは、ポリ(a)+RNAおよびチューブリンmRNAの非局在化のための自然な引き金となる可能性が高いことをお勧めします。
ポリ(a)+RNAおよびチューブリンmRNAは、アフリカツメガエル卵母細胞の周辺に局在し、減数分裂成熟中に非局在化されます。このRNAの非局在化は、細胞へのカルシウムイオンの侵入を減らす薬剤のインキュベーションによって引き起こされる可能性があります(例えば、塩化物やベラパミルなど)。これらの薬剤は通常、減数分裂の成熟を促進しますが、培地へのテオフィリンの添加は成熟を阻害しますが、非局在化を阻害します。減数分裂の成熟を誘発せずにカルシウム侵入を防ぐ操作(例:カルシウムを含まない緩衝液)も、RNAの局在化の破壊を引き起こすように示されています。さらに、細胞からの塩化物流出を減少させる操作(たとえば、塩化コリンとの外部塩化物イオン濃度を増加させる)により、減数分裂の成熟を誘発することなくポリ(A)+ RNAとチューブリンmRNAの局在が破壊されます。卵母細胞が刺激されて減数分裂の成熟を進めた後、アフリカツメガエル卵母細胞に存在するカルシウム依存性塩化物流出は消失します。カルシウムイオンの流入または塩化物イオンの流出の減少は、減数分裂成熟を誘発することなくポリ(A)+RNAとチューブリンmRNAの非局在化を誘導することを示しています。したがって、これらのイオンの膜貫通移動を減らすことは、ポリ(a)+RNAおよびチューブリンmRNAの非局在化のための自然な引き金となる可能性が高いことをお勧めします。
Poly(A)+RNA and tubulin mRNA are localized in the periphery of Xenopus oocytes and become delocalized during meiotic maturation. Delocalization of this RNA can be triggered by incubation in agents which reduce entry of calcium ions into the cell (e.g. lanthanum chloride and verapamil). Although these agents ordinarily promote meiotic maturation, addition of theophylline to the medium will inhibit maturation but not delocalization. Manipulations which prevent calcium entry without inducing meiotic maturation (e.g. calcium-free buffer) are also shown to trigger disruption of the RNA localization. In addition, manipulations which reduce chloride efflux from the cell (e.g. increasing the external chloride ion concentration with choline chloride) result in disruption of the localization of poly (A)+ RNA and tubulin mRNA without inducing meiotic maturation. The calcium-dependent chloride efflux present in Xenopus oocytes disappears after the oocyte has been stimulated to proceed through meiotic maturation. We show that reduction of the influx of calcium ions or efflux of chloride ions induces the delocalization of poly (A)+RNA and tubulin mRNA without inducing meiotic maturation. We suggest, therefore, that reducing the transmembrane movement of these ions is likely to be the natural trigger for the delocalization of poly(A)+RNA and tubulin mRNA.
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