in vitroでのmTORシグナル伝達経路による細胞の成長を抑制し、ヒトSZ95セボシテスの脂質生成を減少させるALA-PDT

背景：5-アミノレブリン酸媒介 - 写真形成療法（ALA-PDT）は、尋常性菌や他の皮脂腺関連疾患の治療に効果的であることが知られています。ただし、ALA-PDTの治療メカニズムは未定のままです。この研究では、ヒトSZ95セボシテスの細胞増殖と脂肪生成に対するALA-PDTの効果とメカニズムを調査することを目的としました。 材料と方法：ヒトSZ95セボシテスを、異なる濃度のALA-PDT.CCK-8アッセイで処理し、細胞増殖活性を検出しました。蛍光顕微鏡とフローサイトメトリーを使用して、ナイル赤染色後のSZ95細胞の脂質の分泌を観察しました。ウエスタンブロッティングを使用して、P-P70 S6K/P70 S6K、P-4E-BP1/4E-BP1、SREBP-1、PPARγ、P-MTOR/MTOR、およびP-Raptor/Raptorのタンパク質発現レベルを検出および分析しました。平均して、MTOR経路活性化因子IGF-1およびMTORC1阻害剤ラパマイシンを添加して、SZ95細胞のALA-PDT処理の干渉を観察しました。 結果：ALA-PDTは細胞の成長を抑制し、SZ95細胞で用量依存的に脂質の分泌を減少させました。ALA-PDTは、p-P70 S6K（T389）、SREBP-1、PPARγ、P-MTOR、およびP-raptorのタンパク質レベルを減少させました。IGF-1はALA-PDTに対抗効果があり、ラパマイシンは細胞の成長を抑制し、脂質の分泌を減らす際にSZ95細胞におけるALA-PDTの効果を高めました。 結論：ALA-PDTは、MTOR-P70 S6K（T389）シグナル伝達によりSZ95細胞の細胞増殖を抑制し、MTOR-SREBP-1/PPARγシグナル伝達によりSZ95細胞の脂質生成を減少させました。皮脂腺萎縮とALA-PDT後の分泌の減少は、脂質細胞の脂質生成と細胞の成長の抑制によって引き起こされる可能性があります。

BACKGROUND: 5-Aminolevulinic acid mediated -photodynamic therapy (ALA-PDT) is known to be effective in treating acne vulgaris and other sebaceous gland-related diseases. However, the therapeutic mechanisms of ALA-PDT still remain undetermined. In this study, we aimed to investigate the effects and mechanisms of ALA-PDT on the cell growth and lipogenesis of human SZ95 sebocytes. MATERIAL AND METHODS: Human SZ95 sebocytes were treated with different concentration of ALA-PDT.CCK-8 assay was used to detect cell proliferation activity. Fluorescence microscope and flow cytometry were used to observe the secretion of lipids in SZ95 cells after Nile red staining. Western blotting was used to detect and analyze the protein expression level of P-p70 S6K/p70 S6K, P-4E-BP1/4E-BP1, SREBP-1, PPARγ, P-mTOR/mTOR, and P-Raptor/Raptor. Mean while, mTOR pathway activator IGF-1 and mTORC1 inhibitor rapamycin were added to observe the interferences on the ALA-PDT treatment of SZ95 cells. RESULTS: ALA-PDT suppressed the cell growth and reduced the secretion of lipids in a dose-dependent manner in SZ95 cells. ALA-PDT reduced the protein levels of P-p70 S6K (T389), SREBP-1, PPARγ, P-mTOR and P-Raptor. IGF-1 had counter effects on ALA-PDT, and rapamycin enhanced the effects of ALA-PDT in SZ95 cells in suppressing the cell growth and reducing the secretion of lipids. CONCLUSION: ALA-PDT suppressed the cell growth in SZ95 cells by mTOR-p70 S6K(T389) signaling and reduced the lipogenesis in SZ95 cells by mTOR-SREBP-1/PPARγ signaling. Sebaceous glands atrophy and reduction of sebum secretion after ALA-PDT may be caused by the suppression of lipogenesis and cell growth in sebocytes.