Sox9は、神経原性領域の外の成体脳の星状細胞特異的核マーカーです

星状細胞は近年、激しい実験的関心の焦点となっていますが、その決定的な識別のマーカーは希少で不完全なままです。星状細胞は、グリア線維性酸性タンパク質、グルタミンシンテターゼ、グルタミン酸トランスポーター1（GLT1）、アクアポリン-4、アルデヒドデヒドロゲナーゼ1ファミリーメンバーL1、およびその他のタンパク質の発現によってそのように認識される場合があります。ただし、これらのタンパク質はすべて発達的および機能的に調節され、有用性を制限する可能性があります。星状細胞表現型の核マーカーの病理学を特定するために、FACS精製成人の星状細胞による微分RNA発現を評価し、それに基づいて、マウスとヒトの両方の脳における転写因子SOX9の発現を評価しました。Sox9は、表彰台細胞と神経因性領域を除き、成体脳の星状細胞によってほぼ排出されることがわかりました。Sox9は神経前駆細胞によっても発現されます。Sox9+細胞とGLT1+細胞のトランスクリプトーム比較により、細胞の2つの集団が主に重複する遺伝子発現を示すことが示されました。Sox9の発現は老化中に減少せず、代わりに、筋萎縮性側索硬化症（SOD1G93A）のマウスモデル、中大脳動脈閉塞、および複数のミニストロークのマウスモデルを含む、多くの環境で活性星状細胞によって上方制御されました。Sox9免疫標識と組み合わせて等方性分画因子技術を使用して、星状細胞の相対数を定量化しました。分析では、Sox9+星状細胞がほとんどのCNS領域で総細胞数の約10〜20％を構成することが示されました。これは、正常な成人の脳で以前に推定されていた総細胞数の割合が少ないことを示しました。 - サイトゾルまたは原形質膜の特異的抗原。ここでは、Sox9が神経因性領域以外のCNSのすべての主要領域における星状細胞特異的核マーカーであることを示しています。Sox9免疫標識に基づいて、星状細胞は通常の成体マウス脳で以前に推定されたよりも総細胞数の割合が少ないことを文書化します。

Astrocytes have in recent years become the focus of intense experimental interest, yet markers for their definitive identification remain both scarce and imperfect. Astrocytes may be recognized as such by their expression of glial fibrillary acidic protein, glutamine synthetase, glutamate transporter 1 (GLT1), aquaporin-4, aldehyde dehydrogenase 1 family member L1, and other proteins. However, these proteins may all be regulated both developmentally and functionally, restricting their utility. To identify a nuclear marker pathognomonic of astrocytic phenotype, we assessed differential RNA expression by FACS-purified adult astrocytes and, on that basis, evaluated the expression of the transcription factor SOX9 in both mouse and human brain. We found that SOX9 is almost exclusively expressed by astrocytes in the adult brain except for ependymal cells and in the neurogenic regions, where SOX9 is also expressed by neural progenitor cells. Transcriptome comparisons of SOX9+ cells with GLT1+ cells showed that the two populations of cells exhibit largely overlapping gene expression. Expression of SOX9 did not decrease during aging and was instead upregulated by reactive astrocytes in a number of settings, including a murine model of amyotrophic lateral sclerosis (SOD1G93A), middle cerebral artery occlusion, and multiple mini-strokes. We quantified the relative number of astrocytes using the isotropic fractionator technique in combination with SOX9 immunolabeling. The analysis showed that SOX9+ astrocytes constitute ∼10-20% of the total cell number in most CNS regions, a smaller fraction of total cell number than previously estimated in the normal adult brain.SIGNIFICANCE STATEMENT Astrocytes are traditionally identified immunohistochemically by antibodies that target cell-specific antigens in the cytosol or plasma membrane. We show here that SOX9 is an astrocyte-specific nuclear marker in all major areas of the CNS outside of the neurogenic regions. Based on SOX9 immunolabeling, we document that astrocytes constitute a smaller fraction of total cell number than previously estimated in the normal adult mouse brain.