鶏の卵白からのオボトランフェリンのプロモード278p加水分解物のin vitro細胞毒性およびACE阻害活性

酵素加水分解を介して卵タンパク質から放出されたペプチドは、抗菌薬、抗酸化、抗加熱剤、免疫調節特性などのさまざまな生物活性を示しています。この研究の目的は、オボトランスフェリンの酵素（ACE）阻害活性とそのプロモード278p酵素加水分解物の細胞毒性およびアンジオテンシン変換酵素（ACE）阻害活性を調査することでした。卵白からのオボトランフェリンは、45°Cのプロモード278pを使用して3時間加水分解しました。MTTアッセイを使用して、オボトランフェリンとプロモード278pヒロズリゼートの細胞毒性は、さまざまな組織起源のヒト癌細胞株で評価されました。ACE阻害活性は、発色基質-HIS-HIS-LEUの切断を使用して決定されました。オボトランスフェリンのプロモード278p加水分解物は、テストされたすべての癌細胞株で20 mg/mlで強力な細胞毒性（> 90％）を示しましたが、オボトランフェリンはそうではありませんでした。5つの異なる癌細胞に対するオボトランフェリンのプロモード278p加水分解物のIC50値は、10.05±1.55、3.45±0.94、4.43±1.87、4.92±0.63、および10.43±3.91 mg/mlでした。Ovotransferrinのプロモード278pハイドロリゼートは、10 mg/mLレベルで強力なACE阻害活性を示しました。10mg/mLレベルで、加水酸塩はACE阻害活性に対する76.82±1.28％阻害、73.33±2.56％、56.85±1.84％、50.32±3.71％、17.30±±0.13％、17.30±1.84％を示しました。それぞれ4.52±6.83％阻害活性5、2.5、1.25、0.625、および0.3125 mg/mLレベル。プロモードのIC50値278Pヒロリゼートオボトランフェリンの加水分解物は1.53±0.20 mg/mlでした。しかし、オボトランフェリンは、アンジオテンシン変換酵素活性に対して阻害効果を示さなかった。この結果は、オボトランフェリンのプロモード278p加水分解物がヒトの抗がん剤および抗水酸化剤として大きな可能性を持っていることを示していますが、機能活動の原因となるペプチドに関する情報はまだ利用できません。

Peptides released from egg proteins via enzymatic hydrolysis show various bioactivities such as antimicrobial, antioxidant, antihypertensive, and immunomodulatory properties. The objective of this study was to investigate the cytotoxic and Angiotensin Converting Enzyme (ACE)-inhibitory activities of ovotransferrin and its promod 278P enzyme hydrolysate. Ovotransferrin from egg white was hydrolyzed using promod 278P at 45°C for 3 hours. Using the MTT assay, the cytotoxicity of ovotransferrin and promod 278P hydrolysate of ovotransferrin were evaluated in human cancer cell lines of various tissue origins. The ACE-inhibitory activity was determined using the cleavage of a chromogenic substrate -Hip-His-Leu. The promod 278P hydrolysate of ovotransferrin showed a potent cytotoxicity (>90%) at 20 mg/mL in all cancer cell lines tested, but ovotransferrin did not. The IC50 value of the promod 278P hydrolysate of ovotransferrin against 5 different cancer cells were 10.05 ± 1.55, 3.45 ± 0.94, 4.43 ± 1.87, 4.92 ± 0.63, and 10.43 ± 3.91 mg/mL for MCF-7, HeLa, HepG2, HT-29, and LoVo cells, respectively. The promod 278P hydrolysate of ovotransferrin showed a strong ACE-inhibiting activity: at 10 mg/mL level, the hydrolysate showed 76.82 ± 1.28% inhibition to ACE-inhibitory activity, and 73.33 ± 2.56%, 56.85 ± 1.84%, 50.32 ± 3.71%, 17.30 ± 0.13%, and 4.52 ± 6.83% inhibitory activity at 5, 2.5, 1.25, 0.625, and 0.3125 mg/mL level, respectively. The IC50 value of the promod 278P hydrolysate of ovotransferrin was 1.53 ± 0.20 mg/mL. However, ovotransferrin did not show any inhibitory effect to angiotensin-converting enzyme activity. This result indicated that the promod 278P hydrolysate of ovotransferrin has a great potential as an anticancer and antihypertension agent for humans, but the information on the peptides responsible for the functional activities is not available yet.