「微生物からの脂質の固液分離抽出におけるBligh and Dyer法とFolch法 溶媒和のメカニズムの解明と代替溶媒への置き換えについて

クロロホルム/メタノール/水を使用した微生物や生物組織からの脂質の抽出と分離のためのブライとダイアー（B＆D）またはfolch手順は何万回も使用されており、抽出された脂質の分析のための「金基準」です。現実的な溶媒のための導体のようなスクリーニングモデル（COSMO-RS）に基づいて、メタノールとクロロホルムの置換に潜在的に適していると酢酸エタノールと酢酸エチルを選択します。これは、酵母（Yarrowia lipolytica IFP29）の固液抽出を行い、その後の液液分配 - 日常的な抽出の2つのステップであることを確認します。この目的のために、私たちは、単相混合物と液体液体混和性ギャップの両方で、水/メタノール/クロロホルムと水/エタノール/酢酸エチルの水/メタノール/エタノール/酢酸エチルの三元相図で同様の点を考慮します。脂質クラスの分布を得るための高性能薄層クロマトグラフィー（HPTLC）、および火炎イオン化検出器（GC/FID）と組み合わせたガスクロマトグラフィーに基づいて、脂肪酸プロファイルを取得するために、この環境に優しい溶媒ペアはほぼ同様に効果的であることがわかります脂質と非脂質材料の効率と選択性の観点から、古典的なメタノールクロロホルムのカップルとして。さらに、これらのバイオソースの溶媒を代替システムとして使用すると、見かけの親水性とは無関係に、微生物組織から抽出された脂質の収量という点で、古典システムと同じくらい効果的であることが示されています。

Bligh and Dyer (B & D) or Folch procedures for the extraction and separation of lipids from microorganisms and biological tissues using chloroform/methanol/water have been used tens of thousands of times and are "gold standards" for the analysis of extracted lipids. Based on the Conductor-like Screening MOdel for realistic Solvatation (COSMO-RS), we select ethanol and ethyl acetate as being potentially suitable for the substitution of methanol and chloroform. We confirm this by performing solid-liquid extraction of yeast (Yarrowia lipolytica IFP29) and subsequent liquid-liquid partition-the two steps of routine extraction. For this purpose, we consider similar points in the ternary phase diagrams of water/methanol/chloroform and water/ethanol/ethyl acetate, both in the monophasic mixtures and in the liquid-liquid miscibility gap. Based on high performance thin-layer chromatography (HPTLC) to obtain the distribution of lipids classes, and gas chromatography coupled with a flame ionisation detector (GC/FID) to obtain fatty acid profiles, this greener solvents pair is found to be almost as effective as the classic methanol-chloroform couple in terms of efficiency and selectivity of lipids and non-lipid material. Moreover, using these bio-sourced solvents as an alternative system is shown to be as effective as the classical system in terms of the yield of lipids extracted from microorganism tissues, independently of their apparent hydrophilicity.