血管細胞における冷たい誘発RHOA活性化に対するアンジェリカギガスの阻害効果

ハーブエキスアンジェリカギガス（AG）は、長年にわたって血管疾患に苦しむ患者に血管拡張剤として適用されてきました。ただし、基礎となるメカニズムは完全には解明されていません。本研究は、AGの抗血管収縮効果は、レイノー現象（RP）で発生する異常な冷たい血管痙攣の治療に効果的である可能性があると仮定した。Rasホモログ遺伝子ファミリーメンバーA（RHOA）の活性に対するAGの効果は、冷たい血管細胞で調査されました。血管細胞をAGに前処理し、その後、温かい（37℃）または寒さ（25℃）インキュベーション30分間前処理し、ウエスタンブロッティング、ELISA、および共焦点顕微鏡で調査しました。寒冷治療は、周皮細胞および血管内皮細胞におけるRHOAの活性化を誘発しましたが、これはAGでの治療により減少しました。さらに、AG治療は、周皮細胞におけるエンドセリン1（ET -1）媒介RHOA活性化を減少させました。しかし、血管内皮細胞による冷たい誘発ET -1産生は、AGでの治療の影響を受けませんでした。さらに、Ag処理により、ストレス繊維と焦点接着複合体の形成、焦点接着キナーゼ、プロトンコゲンチロシンタンパク質キナーゼSRCおよび細胞外シグナル関連キナーゼの冷誘導リン酸化が抑制されました。したがって、AG治療は、周皮細胞および血管内皮細胞における冷たいRHOA活性化を減少させ、周皮細胞のET ‑ 1媒介RHOA活性化を減衰させる能力を示しました。結論として、本研究は、AGがRPの治療に役立つ可能性があることを示しました。

The herbal extract Angelica gigas (AG) has been applied as a vasodilating agent for patients suffering from vascular diseases for many years; however, the underlying mechanism has not been fully elucidated. The present study hypothesized that the anti‑vasoconstrictive effect of AG may be effective in the treatment of abnormal cold‑mediated vasospasms that occur in Raynaud's phenomenon (RP). The effect of AG on the activity of ras homolog gene family member A (RhoA) was investigated in cold‑exposed vascular cells. Vascular cells were pretreated to AG, followed by a warm (37˚C) or cold (25˚C) incubation for 30 min and investigated with western blotting, ELISA and confocal microscopy. Cold treatment induced the activation of RhoA in pericytes and vascular endothelial cells, however this was reduced by treatment with AG. Furthermore, AG treatment reduced the endothelin‑1 (ET‑1)‑mediated RhoA activation in pericytes; however, cold‑induced ET‑1 production by vascular endothelial cells was not affected by treatment with AG. In addition, AG treatment suppressed the formation of stress fibers and focal adhesion complexes, and the cold‑induced phosphorylation of focal adhesion kinase, proto‑oncogene tyrosine‑protein kinase Src and extracellular signal‑related kinase. Therefore, AG treatment demonstrated an ability to reduce cold‑induced RhoA activation in pericytes and vascular endothelial cells, and attenuated ET‑1‑mediated RhoA activation in pericytes. In conclusion, the present study indicated that AG may be useful for the treatment of RP.