超遠心分離と比較して、サイズ排除クロマトグラフィーを使用して分離された細胞外小胞のより高い機能

細胞外小胞（EV）は、細胞間コミュニケーションに関与するナノサイズの脂質二重層密閉粒子です。EVは、ドラッグデリバリービークル、または再生医療への細胞のないアプローチとしてますます考えられています。ただし、臨床応用の主要な課題の1つは、機能的なEVを生成するスケーラブルなEV分離方法を見つけることです。EV分離の黄金基準は超遠心分離（UC）ですが、最近の研究では、サイズ排除クロマトグラフィー（SEC）を使用した分離がより無傷の生物物理学的特性を持つEVを生成することが示唆されました。これが機能の違いにもつながるかどうかは、調査されていないままでした。したがって、UCおよびSecを使用して分離された心筋細胞前駆細胞細胞由来のEVの機能性の可能性のある違いを調査しました。ウエスタンブロット分析では、UC-EVSと比較してSEC-EVSによる刺激後の内皮細胞のPERK/ERK比が高いことを示し、SEC-EVがより高い機能を担っていることを示しています。したがって、EVSの治療可能性をさらに調査するために、SEC-EVを使用することを提案します。分離プロトコルのさらなる最適化は、治療EVの臨床採用を加速する可能性があります。

Extracellular vesicles (EVs) are nano-sized, lipid bilayer-enclosed particles involved in intercellular communication. EVs are increasingly being considered as drug delivery vehicles or as cell-free approach to regenerative medicine. However, one of the major challenges for their clinical application is finding a scalable EV isolation method that yields functional EVs. Although the golden standard for EV isolation is ultracentrifugation (UC), a recent study suggested that isolation using size-exclusion chromatography (SEC) yielded EVs with more intact biophysical properties. Whether this also leads to differences in functionality remained to be investigated. Therefore, we investigated possible differences in functionality of cardiomyocyte progenitor cell-derived EVs isolated using UC and SEC. Western blot analysis showed higher pERK/ERK ratios in endothelial cells after stimulation with SEC-EVs compared to UC-EVs, indicating that SEC-EVs bear higher functionality. Therefore, we propose to use SEC-EVs for further investigation of EVs' therapeutic potential. Further optimization of isolation protocols may accelerate clinical adoption of therapeutic EVs.