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背景：定義されたゼノフリーの血清フリー培地（Mesencult-XF）で培養されたヒト間葉系間質細胞（MSC）の成長特性と神経栄養および血管新生効果を調査しました。 方法：脂肪組織（ASCS）および骨髄（BMSC）からのヒトMSCは、胎児の子牛血清を含む最小限の必須アルファ（α-MEM）またはメセンセルXFで培養されました。増殖は10の通路を超えて測定され、コロニー形成ユニット（CFU）アッセイと分化クラスター（CD）表面マーカーの発現が測定されました。MSCの神経突起の成長と血管新生活性が決定されました。 結果：早期通過で、ASCとBMSCの両方が、標準のαMEM含有血清と比較して、Mesencult-XFでより良い増殖を示しました。ただし、CFUはMesencult-XFで有意に低かった。Mesencult-XFで培養されたASCは、血清で成長した細胞よりも速い速度で拡大し続けました。BMSCは、Mescult-XFの後期通過で形態学的変化を示し、老化β-ガラクトシダーゼ活性に対して陽性でした。CD73とCD90の発現レベルは、さまざまな培養条件下での両方の細胞タイプで類似していましたが、CD105はMesencult-XFの通過10で大幅に減少しました。細胞のin vitro刺激は、脳由来の神経栄養因子（BDNF）、血管内皮成長因子（VEGF-A）およびアンジオポエチン-1の発現を促進しました。Mesencult-XFで成長した刺激ASCは、ニューロンの共培養モデルで最も長い神経突起の伸長を引き起こしました。Mesencult-XFで成長した刺激されたBMSCは、in vitro血管新生アッセイで最も広範な毛細管様チューブ構造のネットワークを生成しました。 結論：ASCSおよびBMSCは、定義された血清を含まない培地で成長した場合、さまざまな神経条件の治療に対する適合性を示す、高レベルの神経栄養および血管新生活性を示します。ただし、Mesencult-XFの長期的な拡大はASCSに限定される可能性があります。
背景：定義されたゼノフリーの血清フリー培地（Mesencult-XF）で培養されたヒト間葉系間質細胞（MSC）の成長特性と神経栄養および血管新生効果を調査しました。 方法：脂肪組織（ASCS）および骨髄（BMSC）からのヒトMSCは、胎児の子牛血清を含む最小限の必須アルファ（α-MEM）またはメセンセルXFで培養されました。増殖は10の通路を超えて測定され、コロニー形成ユニット（CFU）アッセイと分化クラスター（CD）表面マーカーの発現が測定されました。MSCの神経突起の成長と血管新生活性が決定されました。 結果：早期通過で、ASCとBMSCの両方が、標準のαMEM含有血清と比較して、Mesencult-XFでより良い増殖を示しました。ただし、CFUはMesencult-XFで有意に低かった。Mesencult-XFで培養されたASCは、血清で成長した細胞よりも速い速度で拡大し続けました。BMSCは、Mescult-XFの後期通過で形態学的変化を示し、老化β-ガラクトシダーゼ活性に対して陽性でした。CD73とCD90の発現レベルは、さまざまな培養条件下での両方の細胞タイプで類似していましたが、CD105はMesencult-XFの通過10で大幅に減少しました。細胞のin vitro刺激は、脳由来の神経栄養因子（BDNF）、血管内皮成長因子（VEGF-A）およびアンジオポエチン-1の発現を促進しました。Mesencult-XFで成長した刺激ASCは、ニューロンの共培養モデルで最も長い神経突起の伸長を引き起こしました。Mesencult-XFで成長した刺激されたBMSCは、in vitro血管新生アッセイで最も広範な毛細管様チューブ構造のネットワークを生成しました。 結論：ASCSおよびBMSCは、定義された血清を含まない培地で成長した場合、さまざまな神経条件の治療に対する適合性を示す、高レベルの神経栄養および血管新生活性を示します。ただし、Mesencult-XFの長期的な拡大はASCSに限定される可能性があります。
BACKGROUND: The growth properties and neurotrophic and angiogenic effects of human mesenchymal stromal cells (MSCs) cultured in a defined xeno-free, serum-free medium (MesenCult-XF) were investigated. METHODS: Human MSCs from adipose tissue (ASCs) and bone marrow (BMSCs) were cultured in Minimum Essential Medium-alpha (α-MEM) containing fetal calf serum or in MesenCult-XF. Proliferation was measured over 10 passages and the colony-forming unit (CFU) assay and expression of cluster of differentiation (CD) surface markers were determined. Neurite outgrowth and angiogenic activity of the MSCs were determined. RESULTS: At early passage, both ASCs and BMSCs showed better proliferation in MesenCult-XF compared with standard α-MEM-containing serum. However, CFUs were significantly lower in MesenCult-XF. ASCs cultured in MesenCult-XF continued to expand at faster rates than cells grown in serum. BMSCs showed morphological changes at late passage in MesenCult-XF and stained positive for senescence β-galactosidase activity. Expression levels of CD73 and CD90 were similar in both cell types under the various culture conditions but CD105 was significantly reduced at passage 10 in MesenCult-XF. In vitro stimulation of the cells enhanced the expression of brain-derived neurotrophic factor (BDNF), vascular endothelial growth factor (VEGF-A) and angiopoietin-1. Stimulated ASCs grown in MesenCult-XF evoked the longest neurite outgrowth in a neuron co-culture model. Stimulated BMSCs grown in MesenCult-XF produced the most extensive network of capillary-like tube structures in an in vitro angiogenesis assay. CONCLUSIONS: ASCs and BMSCs exhibit high levels of neurotrophic and angiogenic activity when grown in the defined serum-free medium indicating their suitability for treatment of various neurological conditions. However, long-term expansion in MesenCult-XF might be restricted to ASCs.
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