ヒト臍静脈起源のヒト内皮前駆細胞の高品質のin vitro拡大

資格のある内皮前駆細胞（EPCS）の限られた利用可能性は、再生医療にとって大きな課題です。本研究では、ヒトCD34に対する抗体でコーティングされた磁気マイクロビーズを使用して、ヒト臍静脈内皮細胞（HUVEC）からヒトEPCを分離しました。フローサイトメトリーアッセイは、これらの細胞の大部分が初期EPCの3つの分子マーカーであるVEGFR2（KDR）、CD34およびCD133を発現することを示しました。また、バイオリアクターマイクロキャリア細胞培養システム（BIO-MCCS）は、EPCのin vitro拡張のために皿培養よりも優れていることがわかりました。特徴的な分子マーカーの発現によって示され、in vitro血管新生アッセイに基づくマトリックスゲルに基づくように、より良い血管新生の可能性があるように、初期段階にあるより多くのEPCを拡張しました。これらの結果は、HUVECが再生医療用のEPCの新しい有望なリソースであり、Bio-MCCS細胞培養システムがEPCのin vitro拡大に広く使用される可能性があることを示唆しています。

The limited availability of qualified endothelial progenitor cells (EPCs) is a major challenge for regenerative medicine. In the present study, we isolated human EPCs from human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) by using magnetic micro-beads coated with an antibody against human CD34. Flow cytometric assay showed that majority of these cells expressed VEGFR2 (KDR), CD34 and CD133, three molecular markers for early EPCs. It was also found that a bioreactor micro-carrier cell culture system (bio-MCCS) was superior to dish culture for in vitro expansion of EPCs. It expanded more EPCs which were in the early stage, as shown by the expression of characteristic molecular markers and had better angiogenic potential, as shown by matrix-gel based in vitro angiogenesis assay. These results suggest that HUVECs might be a novel promising resource of EPCs for regenerative medicine and that a bio-MCCS cell culture system might be broadly used for in vitro expansion of EPCs.