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背景：最近、従来の非脂質エンベロープ（NLE）A型肝炎ウイルス（HAV）の準脂質エンベロープ（LE）形態は、ヒト血清および細胞培養由来のHAVストックで説明されています。この発見は、このウイルスのNLEの性質の前提の下で行われた血漿産物のウイルスクリアランス研究のHAV減少の理解に挑戦します。ここでは、還元研究に使用されるHAVストックにおけるLE粒子の存在が検証され、LEおよびNLE粒子がヒト血清アルブミンの熱処理中のHAVバリアントの微分熱感度に寄与する可能性があるという仮説が評価されました。 研究の設計と方法：2つの細胞障害性HAVバリアントの細胞培養溶解物と上清、HM175/18FおよびHM175/24Aは、等菌勾配遠心分離によりLEおよびNLE粒子含有量に対して特徴付けられました。得られた画分は、相対感染性について特徴付けられ、12.5％ヒト血清アルブミンで熱処理（58.0±1.0°Cで590±10分）にさらされ、それぞれの熱感度を調査しました。 結果：2つのHAVバリアントの準備には、LE粒子（HM175/24A）またはLEおよびNLE粒子（HM175/18F）が同等の特異的感染性を伴ういずれかを含んでいます。HM175/18Fの場合、LEおよびNLE画分の熱感度は有意な差はなく、ウイルスストック全体の不活性化はNLE粒子の不活性化プロファイルと同一でしたが、HM175/24Aバリアントはより熱敏感でした。 結論：結果は、熱処理研究では、LEまたはNLE HAVの表現型がHAV変異体の選択よりも重要ではなく、最も熱耐性のHM175/18Fを使用する必要があることを示しています。
背景：最近、従来の非脂質エンベロープ（NLE）A型肝炎ウイルス（HAV）の準脂質エンベロープ（LE）形態は、ヒト血清および細胞培養由来のHAVストックで説明されています。この発見は、このウイルスのNLEの性質の前提の下で行われた血漿産物のウイルスクリアランス研究のHAV減少の理解に挑戦します。ここでは、還元研究に使用されるHAVストックにおけるLE粒子の存在が検証され、LEおよびNLE粒子がヒト血清アルブミンの熱処理中のHAVバリアントの微分熱感度に寄与する可能性があるという仮説が評価されました。 研究の設計と方法：2つの細胞障害性HAVバリアントの細胞培養溶解物と上清、HM175/18FおよびHM175/24Aは、等菌勾配遠心分離によりLEおよびNLE粒子含有量に対して特徴付けられました。得られた画分は、相対感染性について特徴付けられ、12.5％ヒト血清アルブミンで熱処理（58.0±1.0°Cで590±10分）にさらされ、それぞれの熱感度を調査しました。 結果：2つのHAVバリアントの準備には、LE粒子（HM175/24A）またはLEおよびNLE粒子（HM175/18F）が同等の特異的感染性を伴ういずれかを含んでいます。HM175/18Fの場合、LEおよびNLE画分の熱感度は有意な差はなく、ウイルスストック全体の不活性化はNLE粒子の不活性化プロファイルと同一でしたが、HM175/24Aバリアントはより熱敏感でした。 結論：結果は、熱処理研究では、LEまたはNLE HAVの表現型がHAV変異体の選択よりも重要ではなく、最も熱耐性のHM175/18Fを使用する必要があることを示しています。
BACKGROUND: Recently, a quasi-lipid-enveloped (LE) form of the traditionally nonlipid-enveloped (NLE) hepatitis A virus (HAV) was described in human serum and cell culture-derived HAV stocks. This discovery challenges the understanding of HAV reduction in virus clearance studies of plasma products, which were performed under the premise of an NLE nature of this virus. Here, the presence of LE particles in HAV stocks used for reduction studies was verified, and the hypothesis that LE and NLE particles might contribute to the differential heat sensitivity of HAV variants during heat treatment of human serum albumin was evaluated. STUDY DESIGN AND METHODS: Cell culture lysates and supernatants of two cytopathic HAV variants, HM175/18f and HM175/24a, were characterized for their LE and NLE particle content by isopycnic gradient centrifugation. The obtained fractions were characterized for relative infectivity and then subjected to heat treatment (58.0 ± 1.0°C for 590 ± 10 minutes) in 12.5% human serum albumin to investigate their respective heat sensitivity. RESULTS: Preparations of the two HAV variants contained either LE particles (HM175/24a) or LE and NLE particles (HM175/18f) with equivalent specific infectivity. For HM175/18f, heat sensitivity of LE and NLE fractions did not differ significantly, and inactivation of the whole virus stock was identical to the NLE particle inactivation profile, whereas the HM175/24a variant was more heat sensitive. CONCLUSION: The results indicate that, in heat-treatment studies, the LE or NLE HAV phenotype is less important than the choice of HAV variant, and the most heat-resistant HM175/18f should be used.
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