MCPIP1は、UVB処理されたケラチノサイトの炎症反応に貢献しています

背景：Regnase-1としても知られる単球化学誘引剤タンパク質-1誘導タンパク質-1（MCPIP1）は、炎症剤、分化、生存率、および増殖に対する細胞応答を含む多くの細胞プロセスを負に調節します。ステムループ構造を認識し、核分解性切断によってそれらを分解することにより、転写産物とmiRNAの安定性を調節することに直接関与するピルトN末端（PIN）ドメインがあります。 目的：UVBストレスに対するヒト原発性ケラチノサイトの応答におけるMCPIP1の役割を調査しました。 方法：ケラチノサイトは、UVB、MCPIP1に対するsiRNA、シグナル伝達経路の薬理学的阻害剤、または対照治療を受けた。MCPIP1およびMCPIP1依存性変化遺伝子発現のmRNAおよびタンパク質レベルは、定量的（Q）-RT-PCRSおよびウエスタンブロットによって分析されました。TNFαとIL-8の分泌はELISAによって決定されました。 結果：ケラチノサイトのUVB治療は、4-8H後のmRNAレベルおよび8-16H後のタンパク質レベルでMCPIP1のアップレギュレーションを誘導しました。MCPIP1の存在量は、NF-κB活性に依存していました。siRNA戦略を使用して、MCPIP1の減少により、IL-8、TNFα、COX-2、およびBCL-2をコーディングする転写産物のアップレギュレーションが発生し、IL-8の放出が強化されることがわかりました。さらに、UVB処理の直後にERK1/2のわずかなアップレギュレーションに加えて、NF-κBおよびp38シグナル伝達経路のリン酸化の減少が観察されました。24時間後、NF-κBとp38についてのみリン酸化の減少が観察されました。さらに、MCPIP1に抑制された細胞では、アポトーシス促進PUMAのレベル、p53のリン酸化型、およびその標的p21の存在量、およびカスパーゼ3の活性は減少しましたが、サイクリンD1のレベルは増加しました。 結論：MCPIP1は、代謝およびアポトーシスプロセスを変化させ、炎症性メディエーターの放出を変更することにより、ケラチノサイトのUVB応答に寄与します。

BACKGROUND: Monocyte chemoattractant protein-1-induced protein-1 (MCPIP1), also known as regnase-1, negatively regulates many cellular processes including the cellular response to inflammatory agents, differentiation, viability, and proliferation. It possesses a PilT N-terminus (PIN) domain that is directly involved in regulating the stability of transcripts and miRNAs by recognizing stem loop structures and degrading them by endonucleolytic cleavage. OBJECTIVE: We investigated the role of MCPIP1 in the response of human primary keratinocytes to UVB stress. METHODS: Keratinocytes were treated with UVB, siRNA against MCPIP1, pharmacological inhibitors of signaling pathways, or subjected to control treatments. The mRNA and protein levels of MCPIP1 and MCPIP1-dependent changes gene expression were analyzed by quantitative (Q)-RT-PCRs and Western blots. Secretion of TNFα and IL-8 was determined by ELISA. RESULTS: UVB treatment of keratinocytes induced upregulation of MCPIP1 at the mRNA level after 4-8h and at the protein level after 8-16h. MCPIP1 abundance depended on NF-κB activity. Using an siRNA strategy, we found that diminished MCPIP1 resulted in an up-regulation of transcripts coding for IL-8, TNFα, COX-2, and BCL-2, as well as an enhanced release of IL-8. Moreover, decreased phosphorylation of NF-κB and p38 signaling pathways were observed in addition to a slight up-regulation of ERK1/2 directly after UVB treatment. Twenty-four hours later, decreased phosphorylation was observed only for NF-κB and p38. Furthermore, in MCPIP1-suppressed cells, the levels of pro-apoptotic Puma, the phosphorylated form of p53 and the abundance of its target p21 as well as the activity of caspase 3 decreased, while the level of cyclin D1 increased. CONCLUSION: MCPIP1 contributes to the UVB response of keratinocytes by altering metabolic and apoptotic processes and the release of inflammatory mediators.