*注射可能な組換えコラーゲンIペプチドベースのマクロパラスマイクロキャリアは、C2C12およびヒト骨髄由来間葉系間質細胞の優れた拡張を可能にし、ミネラル化マトリックスの堆積をサポートします

細胞外マトリックス（ECM）に触発された合成材料に基づく足場製剤の開発は、細胞と足場の両方の移植がしばしば必要とされる骨組織工学アプローチにおける細胞ベースの治療の進歩のための重要なリソースを構成します。多孔質マイクロキャリア（MCS）で細胞を培養すると、3次元微小環境での細胞拡大が可能になり、低侵襲細胞と足場の同時送達の可能な解決策が構成されますが、いくつかの市販のMCの潜在的な寸法と細孔相互接続直径の減少は、因果細胞内容を制限します。この研究では、C2C12細胞のコラーゲンIベースの組換えペプチド（CellNest™）に基づいた新しいマクロ極性MCの可能性を調査しました。1-エチル-3-（3-ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（EDC）細胞の活力、増殖、およびHBMSCの分化に関する架橋戦略。直径20〜40μmの外細孔、73％の多孔性、および20±3μmの細孔相互接続直径の外側の孔を特徴とするMCの製造用の二重乳化プロトコルを確立し、MCへの細胞の成長と増殖を支持します。DHTとHMDICと架橋されたMCSは、7日間にわたって市販の等価物と比較してより高い細胞増殖をサポートし、28日目までに細胞収量が高くなりました。さらに、CellNEST-MCでのHBMSCの拡大は、骨形成のポテンシャル化の可能性がある場合にcol1A1Aの浸透性のポテンシャルである葉状生成の可能性がある葉状生成の可能性のある角質生成の可能性のある角質原性のマーカーの初期マーカーの有意なアップレギュレーションを引き起こしませんでした。分化培地では、鉱化されたECM堆積によって確認されています。CellNest-MCSは、臨床的に関連する細胞量に到達し、最終的に臨床診療における骨組織工学のための細胞ベースの治療法の翻訳を加速するのに役立つと考えています。

The development of scaffold formulations based on extracellular matrix (ECM)-inspired synthetic materials constitutes an important resource for the advance of cell-based therapies in bone tissue engineering approaches, where both cell and scaffold implantation are often needed. Culturing cells on porous microcarriers (MCs) allows cell expansion in a three-dimensional microenvironment and constitutes a possible solution for minimally invasive cell and scaffold simultaneous delivery, but the reduced pore dimension and pore interconnection diameter of several commercially available MCs limits de facto cell ingrowth, and ultimately their suitability for in vivo cell delivery. In this study we investigated the potential of a new macroporous MC based on a collagen I-based recombinant peptide (Cellnest™) for C2C12 cells and human bone marrow-derived mesenchymal stromal cells (hBMSCs) expansion and we analyzed the influence of dehydrothermal (DHT), hexamethylene diisocyanate (HMDIC), and 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide (EDC) cross-linking strategies on cell vitality, proliferation, and hBMSCs differentiation. We established a double emulsification protocol for the manufacturing of MCs characterized by external pores of 20-40 μm diameter, 73% porosity, and 20 ± 3 μm pore interconnection diameter supporting cell ingrowth and proliferation into the MC. MCs cross-linked with DHT and HMDIC supported higher cell proliferation comparing to a commercially available equivalent over the course of 7 days and resulted in higher cell yield by day 28. Moreover, while hBMSCs expansion on Cellnest-MCs did not lead to a significant upregulation of the early markers of osteogenic differentiation Col1a1 and Runx2, their differentiation potential into the osteogenic lineage was preserved when cultured in differentiation medium, as confirmed by mineralized ECM deposition. We believe that Cellnest-MCs will help in reaching clinically relevant cell quantities and ultimately help in accelerating the translation of cell-based therapies for bone tissue engineering in the clinical practice.