マルチカラー免疫測定法の抗体選択における動物種の制約を排除する

単一細胞レベルでの分子プロファイリングは、細胞内解像度で個々の細胞の遺伝子発現パターンの謎を明らかにするのに役立ち、人口レベルでしばしば見落とされる小さなが意味のあるバリエーションの発見を可能にします。他の免疫測定法と同様に、最も一般的で経済的なプロトコルは、一次抗体（1'AB）とフルオロフォア標識二次抗体（2'ABS）を組み合わせて開発されます。ただし、1 'および2' absの選択は動物種の入手可能性によって制限されており、その結果、多重化能力が低くなります。ここでは、同じ動物種からすべて1'ABSを使用して、前に組み込まれたABペアの開発を報告します。複数の分子ターゲットに、交差反応性なしに同時にラベルを付けることができることを示します。このシンプルで一般的な自己組織化技術は、マルチカラー免疫測定法の動物種の制約を排除し、幅広い生物医学および臨床アプリケーションにエキサイティングな新しい機会を提供します。

Molecular profiling on the single-cell level helps unveil the mystery of gene expression patterns in individual cells at subcellular resolution, enabling discovery of small but meaningful variations that are often overlooked at the population level. Similar to other immunoassays, the most common and economical protocols are developed by combining primary antibodies (1'Abs) and fluorophore-labeled secondary antibodies (2'Abs). The selection of 1' and 2' Abs, however, has been limited by the availability of animal species, consequently resulting in low multiplexing capability. Here we report the development of preassembled Ab pairs using 1'Abs all from the same animal species. We show that multiple molecular targets can be simultaneously labeled without cross reactivity. This simple and general self-assembly technology eliminates the animal species constraints in multicolor immunoassays, offering exciting new opportunities for a wide range of biomedical and clinical applications.