測定品質指標を監視することにより、インスリン様成長因子1 MaldimmunoAssayの一貫したパフォーマンスを保証する

質量分析（MS）に基づく分析方法は、バイオマーカー発見研究に成功裏に適用されていますが、バイオマーカー候補を臨床診断に翻訳するMSの役割はあまり顕著ではありません。免疫親和性の濃縮とマトリックス支援レーザー脱着イオン化イオン化時間（MALDI-TOF）質量分析の検出を組み合わせたMaldimmunoAssaysメソッド - 動作の容易さとハイスループット能力により、大規模なサンプル分析のための魅力的な分析アプローチがあります。この事実にもかかわらず、Maldimmunoassaysは臨床診断では広く使用されていません。これは、主にサンプルの準備とMALDIプロセス自体の変動を適切に修正できる内部基準の利用可能性が限られているためです。ここでは、ヒト血漿中のインスリン様成長因子1（IGF1）を定量化するための新しいMaldimmunoAssayを提示します。10-1000 ng/mLの範囲での信頼できるIGF1の定量化は、15N-IGF1を内部標準として使用することで達成されました。これは、IGF1 MaldimmunoAssayの重要な特徴であることが証明されました。この方法は、米国食品医薬品局（FDA）ガイドラインに従って検証されました。これには、硫酸ナトリウム（SDS）を使用したIGF1/IGF結合タンパク質（IGF1/IGFBP）の複雑な解離の有効性の実証が含まれます。さらに、MaldimmunoAssayは、MaldimmunoAssayによって実質的に低いレベルが報告されていますが、高い相関とIDS-ISYS IGF1イムノアッセイとよく比較されました（R2 = 0.99）。この方法は、臨床環境でのパフォーマンスを評価するために、腎移植レシピエントのコホートから1000を超えるサンプルでテストされました。この研究に基づいて、測定の品質を監視するために読み取りを特定しました。私たちの研究は、適切な内部標準が使用され、測定の品質を評価するために読み出しが監視されていることを条件に、Maldi-TOF質量分析が定量的バイオマーカー分析に適していることを示しています。

Analytical methods based on mass spectrometry (MS) have been successfully applied in biomarker discovery studies, while the role of MS in translating biomarker candidates to clinical diagnostics is less pronounced. MALDImmunoassays-methods that combine immunoaffinity enrichment with matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight (MALDI-TOF) mass spectrometric detection-are attractive analytical approaches for large-scale sample analysis by virtue of their ease of operation and high-throughput capabilities. Despite this fact, MALDImmunoassays are not widely used in clinical diagnostics, which is mainly due to the limited availability of internal standards that can adequately correct for variability in sample preparation and the MALDI process itself. Here we present a novel MALDImmunoassay for quantification of insulin-like growth factor 1 (IGF1) in human plasma. Reliable IGF1 quantification in the range of 10-1000 ng/mL was achieved by employing 15N-IGF1 as internal standard, which proved to be an essential feature of the IGF1 MALDImmunoassay. The method was validated according to U.S. Food and Drug Administration (FDA) guidelines, which included demonstrating the effectiveness of IGF1/IGF binding protein (IGF1/IGFBP) complex dissociation using sodium dodecyl sulfate (SDS). Furthermore, the MALDImmunoassay compared well with the IDS-iSYS IGF1 immunoassay with high correlation (R2 = 0.99), although substantially lower levels were reported by the MALDImmunoassay. The method was tested on >1000 samples from a cohort of renal transplant recipients to assess its performance in a clinical setting. On the basis of this study, we identified readouts to monitor the quality of the measurements. Our work shows that MALDI-TOF mass spectrometry is suitable for quantitative biomarker analysis provided that an appropriate internal standard is used and that readouts are monitored to assess the quality of the measurements.