神経芽細胞腫細胞におけるフォルスコリンとジブリル環状アンプの効果の比較：ジブニール環状アンプの作用の一部が酪酸によって媒介されるという証拠

フォルスコリン、N6,2'-O-ジブリルデノシン3 '：5'-環状単リン酸（ジブリル環状AMP、BT2-CAMP）の効果を比較し、神経芽細胞腫細胞生理学のいくつかの側面で酪酸を比較しました。神経2A細胞の形態は、フォルスコリンとBT2キャンプとのインキュベーション後に類似していたが、これは広範囲の神経突起の脱成長を引き起こしたが、酪酸の存在下ではいくつかの初歩的な神経突起が形成されたが、それほど広範ではなかった。すべての化合物は細胞増殖の用量依存性阻害を生成しましたが、BT2-CAMPの効果はフォルスコリンによって引き起こされる効果よりも顕著であるため、BT2-CAMPの効果は部分的に放出された酪酸によるものであることを示しています。アセチルコリンエステラーゼ活性は、未処理の細胞またはフォルスコリン処理細胞よりも酪酸またはBT2キャンプでインキュベートした細胞で低かった。これは、環状アンプがこの酵素の調節に役割を果たさないことを示唆しています。BT2-CAMPは、培養細胞における酪酸のよく知られている効果であるヒストンアセチル化を生成しましたが、フォルスコリンはこの修飾に影響しませんでした。その結果、クロマチンタンパク質のアセチル化の変化を介して酪酸によって濃度が調節される核タンパク質である甲状腺ホルモン受容体のレベルは、BT2-CAMPまたは酪酸とインキュベートした細胞で減少しましたが、フォルスコリンの影響を受けませんでした。酪酸塩は、細胞分裂をブロックする異なる治療の結果として神経芽細胞腫細胞で増加するタンパク質であるヒストンH1（0）の濃度を上昇させました。BT2-CAMPで処理された細胞におけるH1（0）の濃度は、酪酸塩とフォルスコリンで治療後に見られるものの間の中間レベルにありました。現在の結果は、神経芽細胞腫細胞に対するBT2-CAMPの効果の一部が、環状ヌクレオチド自体ではなく、この化合物のブチリル部分に起因する可能性があることを明確に示しています。

We have compared the effects of forskolin, N6,2'-O-dibutyryladenosine 3':5'-cyclic monophosphate (dibutyryl cyclic AMP, Bt2-cAMP), and butyrate on several aspects of neuroblastoma cell physiology. The morphology of Neuro 2A cells was similar after incubation with forskolin and Bt2-cAMP, which caused extensive neurite outgrowth, whereas in the presence of butyrate some rudimentary neurites were formed but they were not nearly as extensive. All compounds produced a dose-dependent inhibition of cell proliferation, but the effect of Bt2-cAMP was more marked than that caused by forskolin, thus showing that the effect of Bt2-cAMP is due partially to the butyrate released. Acetylcholinesterase activity was lower in the cells incubated with butyrate or Bt2-cAMP than in untreated cells or in forskolin-treated cells. This suggests that cyclic AMP does not play a role in the regulation of this enzyme. Bt2-cAMP produced histone acetylation, a well-known effect of butyrate in cultured cells, whereas forskolin did not affect this modification. Consequently, the levels of thyroid hormone receptor, a nuclear protein whose concentration is regulated by butyrate through changes in acetylation of chromatin proteins, were decreased in cells incubated with Bt2-cAMP or butyrate, but were unaffected by forskolin. Butyrate elevated the concentration of histone H1(0), a protein that increases in neuroblastoma cells as a result of different treatments that block cell division. The concentration of H1(0) in the cells treated with Bt2-cAMP was at a level intermediate between that found after treatment with butyrate and with forskolin. The present results clearly indicate that some of the effects of Bt2-cAMP on neuroblastoma cells can be attributed to the butyryl moiety of this compound rather than to the cyclic nucleotide itself.