共免疫沈降およびグルタチオン-S-トランスフェラーゼ（GST）プルダウンアッセイによるATM相互作用タンパク質の同定

ATMキナーゼはDNA損傷応答のマスターレギュレーターであり、DNA損傷に応じて700を超えるタンパク質と相互作用できます。これらの相互作用は、複数の細胞ストレッサーに対するATMの反応を微調整する上で重要な役割を果たし、その活動を調節する上で肯定的または否定的な役割の両方を果たすことができます。ここでは、ATMの分子相互作用を理解するために、共免疫沈降やグルタチオン-S-トランスフェラーゼ（GST）融合タンパク質プルダウンアッセイを含むタンパク質間相互作用方法を使用して詳細に詳述します。これらのアッセイは、実験室内で簡単に確立できるため、ATMの役割に関する貴重な機能的洞察を与えます。

The ATM kinase is a master regulator of the DNA damage response, and can interact with more than 700 proteins in response to DNA damage. These interactions play a critical role in fine-tuning the response of ATM to multiple cellular stressors, and can play both a positive or negative role in regulating its activity. Here, we detail using protein-protein interaction methods, including co-immunoprecipitation and Glutathione-S-transferase (GST) fusion protein pull-down assays to understand the molecular interactions of ATM. These assays give valuable functional insights into the role of ATM, as they are easy to establish within the laboratory, are not overly laborious, and are easily reproducible.