マウスサイトメガロウイルスゲノムの挿入変異誘発：1つの顕著なアルファ遺伝子（IE2）は、成長に不可欠です

挿入変異誘発を利用して、マウスサイトメガロウイルス（MCMV）の機能的重要性を、早期（IEまたはアルファ）領域2（IE2）の複製で調査しました。IE2転写ユニットに挿入されたMCMVアルファプロモーター/エンハンサーの転写制御下で大腸菌LACZ遺伝子を運ぶ組換えウイルスRM408を構築しました。RM408は、特定のCMV遺伝子で最初に定義された遺伝的変異を運びます。NIH3T3細胞の感染後、RM408は、組換えで無傷のままである天然IE1遺伝子産物の速度と区別できない速度で、存在量のベータガラクトシダーゼを発現しました。RM408感染細胞のIE2領域から発現は検出されませんでした。RM408における他のウイルス遺伝子の成長速度、収量、および発現は、野生型MCMVに類似しており、IE2遺伝子産物が細胞培養の成長に必須ではなかったことを示しています。

We have utilized insertional mutagenesis to investigate the functional importance of murine cytomegalovirus (MCMV) immediate early (IE or alpha) region 2 (ie2) in replication. We constructed a recombinant virus, RM408, that carries the Escherichia coli lacZ gene under transcriptional control of the MCMV alpha promoter/enhancer inserted within the ie2 transcription unit. RM408 carries the first defined genetic mutation in a specific CMV gene. After infection of NIH3T3 cells, RM408 expressed beta-galactosidase in abundance and with kinetics indistinguishable from those of the natural ie1 gene product which is left intact in the recombinant. We detected no expression from the ie2 region in RM408-infected cells. Growth kinetics, yield, and expression of other viral genes in RM408 was similar to wild-type MCMV, indicating that the ie2 gene product was nonessential for growth in cell culture.