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DNAプローブを使用した蛍光in situハイブリダイゼーション(FISH)により、遺伝子コピー数の視覚化と、蛍光顕微鏡による特定のDNA標的の局在化が可能になります。培養中の細胞、中期染色体、および組織切片が固定され、ガラススライドに調製されます。細胞内のDNAと蛍光標識プローブの両方が変性され、標識プローブは細胞DNAにハイブリダイズすることができます。スライドは洗浄され、染色され、蛍光顕微鏡を介して表示されます。DNAのコピー数の変化と、ホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)組織切片と細胞培養調製のDNAコピー数の変化と構造染色体再編成を含む研究のためのスライドとプローブを準備するための基本的な方法について説明します。
DNAプローブを使用した蛍光in situハイブリダイゼーション(FISH)により、遺伝子コピー数の視覚化と、蛍光顕微鏡による特定のDNA標的の局在化が可能になります。培養中の細胞、中期染色体、および組織切片が固定され、ガラススライドに調製されます。細胞内のDNAと蛍光標識プローブの両方が変性され、標識プローブは細胞DNAにハイブリダイズすることができます。スライドは洗浄され、染色され、蛍光顕微鏡を介して表示されます。DNAのコピー数の変化と、ホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)組織切片と細胞培養調製のDNAコピー数の変化と構造染色体再編成を含む研究のためのスライドとプローブを準備するための基本的な方法について説明します。
Fluorescence in situ hybridization (FISH) with DNA probes allows the visualization of gene copy number and localization of specific DNA targets with fluorescence microscopy. Cells in culture, metaphase chromosomes, and tissue sections are fixed and prepared on glass slides. Both the DNA in the cells and fluorescently labeled probe are denatured, and the labeled probe is allowed to hybridize to the cellular DNA. The slides are washed, counterstained, and viewed via fluorescence microscopy. We describe the basic method for preparing slides and probes for studies involving DNA copy number changes and structural chromosome rearrangements in formalin-fixed paraffin-embedded (FFPE) tissue sections and cell culture preparations.
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