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Cold Spring Harbor protocols2017Jun01Vol.2017issue(6)

ビブラトームを使用して厚いセクションを切断します

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文献タイプ:
  • Journal Article
概要
Abstract

振動するミクロトーム(バイブラトーム)で切断することは、免疫組織化学およびその場ハイブリダイゼーションに使用できる厚い切片を生成するための貴重な手順です。β-ガラクトシダーゼやアルカリホスファターゼ染色、蛍光およびダブ(ジアミノベンジジン)免疫染色などのさまざまな全マウント組織手順にさらされた組織および胚の組織学的および3Dの詳細を明らかにするのに特に役立ちます。ビブラトームの切片は、過酷な有機溶媒を伴うものではないため、蛍光抗体または色素で染色された標本の処理に適しています。さらに、その後の培養、操作、およびライブイメージングのために、生きた組織を切断できます。ビブラトームのセクションに必要な材料はほとんどありません。これは、迅速に習得される比較的簡単な手順です。このプロトコルでは、組織学で通常使用される任意の染色手順に使用できる基本的なビブラトームセクションについて説明します。

振動するミクロトーム(バイブラトーム)で切断することは、免疫組織化学およびその場ハイブリダイゼーションに使用できる厚い切片を生成するための貴重な手順です。β-ガラクトシダーゼやアルカリホスファターゼ染色、蛍光およびダブ(ジアミノベンジジン)免疫染色などのさまざまな全マウント組織手順にさらされた組織および胚の組織学的および3Dの詳細を明らかにするのに特に役立ちます。ビブラトームの切片は、過酷な有機溶媒を伴うものではないため、蛍光抗体または色素で染色された標本の処理に適しています。さらに、その後の培養、操作、およびライブイメージングのために、生きた組織を切断できます。ビブラトームのセクションに必要な材料はほとんどありません。これは、迅速に習得される比較的簡単な手順です。このプロトコルでは、組織学で通常使用される任意の染色手順に使用できる基本的なビブラトームセクションについて説明します。

Sectioning with a vibrating microtome (vibratome) is a valuable procedure for generating thick sections that can be used for immunohistochemistry and in situ hybridization. It is particularly useful for revealing histological and 3D detail in tissues and embryos that have been subjected to various whole-mount histological procedures such as β-galactosidase and alkaline phosphatase staining, and fluorescent and DAB (diaminobenzidine) immunostaining. Vibratome sectioning does not involve any harsh organic solvents and is therefore suited for processing specimens stained with fluorescent antibodies or dyes. In addition, live tissue can be sectioned for subsequent culture, manipulation, and live imaging. Very few materials are required for vibratome sectioning, and it is a relatively straightforward procedure that is quickly mastered. This protocol describes basic vibratome sectioning that can be used for any staining procedure typically used in histology.

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