胚中心におけるT-b細胞相互作用の生存顕微鏡

胚中心における抗原特異的T-B相互作用の動的イメージング分析は、親和性成熟の根底にある分子メカニズムの理解を進め、in vivoで濾胞ヘルパーT細胞がどのように機能するかについての豊富な情報を提供しました。ここでは、胚中心の蛍光タンパク質発現、抗原特異的TおよびB細胞を視覚化する日常的な方法について説明します。機能的記者を組み込むためのプロトコルまたはレトロウイルス形質導入によるT細胞の遺伝的摂動も、FRETベースのカルシウムレポーターを例として使用して、簡単に説明します。

Dynamic imaging analyses of antigen-specific T-B interactions in germinal centers have advanced our understanding of the molecular mechanisms underlying affinity maturation and provided a wealth of information about how follicular helper T cells function in vivo. Here we describe a routine method to visualize fluorescence protein-expressing, antigen-specific T and B cells in germinal centers. The protocol for incorporating functional reporters or genetic perturbation of the T cells by retroviral transduction is also briefly described, using the FRET-based calcium reporter as an example.